急性パラコート中毒による肺線維化の機構とその進展阻止治療薬の探索的研究

2005 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 15590571
• Research Institution: Asahikawa Medical College
• Principal Investigator: 塩野 寛 旭川医科大学, 医学部, 副学長 (20112451)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 松原 和夫 旭川医科大学, 医学部, 教授 (20127533) ; 浅利 優 旭川医科大学, 医学部, 助手 (40360979) ; 安積 順一 旭川医科大学, 医学部, 助教授 (00045551)
• Keywords: パラコート / 肺障害 / 酸化的ストレス / ACE阻害作用 / 一酸化窒素 / アポトーシス

Research Abstract

除草剤として世界的に広く使用されているパラコート(PQ)は、急性毒性として肺及び肝腎障害を生じ、慢性毒性(環境毒性として)では中枢神経障害を生じることがしられている。マウスを用いた実験から得られた生存曲線より、各種抗酸化剤及びACE阻害薬は、PQ毒性を抑制し生存率の向上が認められた。一方、PQによる中枢神経障害を抑制したドパミン作動薬やドパミントランスポーター阻害薬は、肺障害にはむしろ促進的に作用した。ACE阻害薬は、抗酸化作用があることが知られている。ACE阻害薬によるPQ毒性軽減には、酸化的ストレス抑制が関与していると考えられる。そこで、この機構を解明するために、PQ投与後2日及び4日後の肺組織ホモジネートについて、SDS-PAGEを行った。Cleaved caspase-3及びnitrotyrosine抗体によって、ウエスタンブロットを行い、抗体で染色された蛋白量はアクチンを指標として半定量化した。PQによって、nitrotyrosine抗体に反応する蛋白質が著明に増加し、PQ肺毒性に一酸化窒素による酸化的ストレスの関与が示唆された。このnitorotyrosine抗体に反応する蛋白質を免疫沈降法を用いて精製したところ、Mn-SODと考えられた。Mn-SODは、活性中心tyrosine残基を有し、ニトロ化されると活性を消失することが知られている。従って、PQによる酸化ストレスはさらに増大されることが示唆された。一方、アポトーシスの指標であるCleaved caspase-3は、PQによって、わずかに検出された。この変化はPQ投与後2日後から著明に観察された。Captoprilによって、これらの蛋白質の出現が著明に減少した。従って、ACE阻害薬はPQによる酸化障害を防御し、PQ中毒時の治療薬として期待できる可能性が示唆された。