2004 Fiscal Year Annual Research Report
甲状腺ホルモンによる甲状腺刺激ホルモンα、β鎖への負の調節の研究
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15590973
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| Research Institution | Hamamatsu University School of Medicine |
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Principal Investigator |
佐々木 茂和 浜松医科大学, 医学部附属病院, 講師 (20303547)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
中村 浩淑 浜松医科大学, 医学部, 教授 (60164331)
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| Keywords | 甲状腺刺激ホルモン / 甲状腺ホルモン / 甲状腺ホルモン受容体 / GATA2 / Pit1 / 下垂体 / 核内受容体 / 転写調節 |
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| Research Abstract |
私達はすでに(A)TSH産生細胞への分化決定因子である転写因子PitltとGATA2に加え、甲状腺ホルモン受容体(TR)も発現すれば腎臓由来のCV1細胞において甲状腺刺激ホルモン(TSH)β鎖に対する甲状腺ホルモン(T3)による転写抑制(負の調節)が観察できること。(B)Pit1とGATA2による基礎転写活性をTRはT3依存性に抑制するが、T3非結合のTR単独では転写を活性化できない。(C)従来、負の調節に必要とされていた配列は必要でないこと、(D)TSHβのみならずα遺伝子においてもGATA2は転写を活性化するばかりでなく、TRによる負の調節にも重要であることを報告している。その後、
1、GATA2結合配列の3'側配列(SR)にはその転写活性化能を抑制する因子が結合し、Pit1はGATA-REの5'側に結合してこの抑制を打ち消す。
2、またT3とTRによる負の調節はPit1の過剰発現により減弱することからPit1はGATA2と安定な複合体を形成しGATA2の機能を安定化していると考えられた。
3、SRを除去するとTSHβプロモーターはGATA2のみで活性化され、T3とTRによる負の調節を受ける。
4、このような抑制はGATA1や3でも観i察される。
5、GATA2の欠失変異体の検討からGATA1-3に共通なZnフィンガー領域がT3とTRによる負の調節に重要である。
6、実際、GSTプルダウンアッセイで検討するとTRとGATA2のDNA結合領域同士が蛋白-蛋白相互作用することが判明した。
7、TRとGATA2に共通なコアクチベーターであるTR associatingprotein(TRAP)220が負の調節に関与する事が示唆された。
8、クロマチン免疫沈降法により、ヒストンアセチル化の低下とTRAP220の離脱が観察された。
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