2004 Fiscal Year Annual Research Report
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15591013
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| Research Institution | Nagasaki University |
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Principal Investigator |
宮崎 泰司 長崎大学, 医学部・歯学部附属病院, 講師 (40304943)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
鵜殿 平一郎 長崎大学, 理化学研究所・免疫・アレルギー科学総合センター, チームリーダー (50260659)
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| Keywords | ETS遺伝子 / TAP法 / MEF遺伝子 |
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| Research Abstract |
MEFは、ETSファミリーに属する転写因子で、遺伝子破壊マウスの実験よりNK細胞におけるパーフォリン遺伝子発現に必須であるが、T細胞ではMEFを欠いていてもパーフォリン遺伝子が発現することがわかっている。これを解明するためにMEFと結合する蛋白質を同定すべくTandem Affinity Purification(TAP)法に引き続いて質量分析法を実施した。293T細胞にTAPベクターに組み込んだMEFを導入し、角蛋白質を抽出した後、アフィニティーカラムを用いて2段階の精製を行った。繰り返しの実験でSDS-PAGE上、同じパターンの蛋白質が得られ、還元・アルキル化の条件の下でそれらを質量分析によって解析した。その結果以下の蛋白質として同定された。すなわち、(1)Myb binding protein1,(2)nucleolin,(3)MEF,(4)RNA helicase,(5)vimentin,(6)nucleophpsminである。この中で(1)は転写制御蛋白との相互作用が報告されており、また(2)、(6)はいずれも核-細胞質間の蛋白輸送に関与すると報告され、幾つかの転写因子の活性を制御することが知られている。さらに、MEF結合蛋白質の対象としてMEF自身が同定されていることにより、二量体としてのMEF野天社活性作用も予想される。現在、これらのcDNAをPCR法を用いてクローニングし、個々の蛋白質についてMEFとの相互作用の検討中である。
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Research Products
(1 results)
