グリア細胞成長因子を介した細胞シグナルの中枢神経発達における役割

2003 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 15591121
• Research Institution: Nagoya City University
• Principal Investigator: 浅井 清文 名古屋市立大学, 大学院・医学研究科, 教授 (70212462)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 青山 峰芳 名古屋市立大学, 大学院・医学研究科, 助手 (70363918) ; 三浦 裕 名古屋市立大学, 大学院・医学研究科, 助教授 (90285198)
• Keywords: EIA / GMFB / GMFG / グリア / アストロサイト

Research Abstract

本年度は、ヒト および、マウスのGMF-gamma(以下GMFG)のgenomic DNAの解析を進めた。また、昨年度確立したラットGMF-beta(以下GMFB)、GMFGに対するEnzyme Immunoassay(EIA)系を用いて、ラットおよびヒト臓器における分布、血清中の年齢による変化をを検討した。
[1]GMFG genomic DNAの解析:ヒト及びマウスGMFGのgenomic DNAをクローニングし、塩基配列を決定した。その結果、ヒトおよびマウスともGMFGは7つのexonより構成されることが判明した。Promoter部位はTATA lessで、housekeeping gene様のGC rich promoterであった。また、転写開始点が数カ所あることが判明した。ルシフェラーゼアッセイによりエンハンサー領域の解析を行った。ヒトGMFGプロモーターについては報告し(Kawai et al.BBA 1625(2003)246-252)、マウスGMFGプロモーターについては投稿準備中である。
[2]Enzyme Immunoaasay(EIA)系によるGMFsの定量:昨年度確立したラットGMFB、GMFGに対する特異的抗体によるEIA系を用いて、ラットおよびヒトの各種臓器中のGMFB、GMFGの濃度を測定した。その結果、GMFBは、中枢神経でもっとも発現が高く、それ以外に、脾臓、胸腺、肺、腸管にも分布していた。一方、GMFGは、胸腺での発現が圧倒的に高く、ついで、脾臓に発現が高かった。また、ラットおよびヒト血清中濃度を測定したところ、GMFBは年齢、性別による変化は無かったが、GMFGは、年齢とともに低下傾向であったが、性別による相違は無かった(Inagaki et al.BBA 1670(2004)208-216)。

Research Products

• [Publications] Inagaki, M.et al.: "Sensitive immunoassays for human and rat GMFB and GMFG, tissue distribution and age-related changes."Biochim.Biophys.Acta. 1670. 208-216 (2004)
• [Publications] Arima, H.et al.: "Hyperosmolar mannitol stimulates expression of aquaporin 4 and 9 through a p38 mitogen-activated protein kinase-dependent pathway in rat astrocytes"J.Biol.Chem.. 278. 44525-44534 (2003)
• [Publications] Fujita, Y.et al.: "Effect of mild hypothermia on the expression of aquaporin family in cultured rat astrocytes under hypoxic condition."Neurosci.Res.. 47. 437-444 (2003)
• [Publications] Kawai, Y.et al.: "Structure and promoter activity of the human glia maturation factor-gamma gene : a TATA-less, GC-rich and bidirectional promoter."Biochim.Biophys.Acta. 1625. 246-252 (2003)