進行腎癌テーラーメイド治療のためインターフェロン感受性関連遺伝子の網羅的解析

2003 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 15591669
• Research Institution: University of Tsukuba
• Principal Investigator: 島居 徹 筑波大学, 臨床医学系, 助教授 (80235613)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 吉川 和宏 愛知医科大学, 医学部, 講師 (60109759) ; 内田 和彦 筑波大学, 基礎医学系, 助教授 (90211078)
• Keywords: 腎細胞癌 / インターフェロン / マイクロアレイ / 遺伝子発現 / 網羅的解析

Research Abstract

目的:腎癌のインターフェロンα(IFNα)感受性を制御する遺伝子を検索するため、腎癌細胞においてIFNαによる遺伝子発現の静的動的変化を基礎的、臨床的に検討する。
対象と方法:臨床的検討は腎癌切除組織14例、腎正常部分4例で、Trizol法でtotal RNAを抽出し、3,840クローンのマイクロアレイに^<33>Pでラベル下にハイブリダイズした。シグナルはAISarrayVisionで検出し、GeneSpringにて解析した。4例においては治療的にIFNを投与したため、その反応性と遭伝子発現パターンを検討した。
一方、in vitroでは予め分類したIFNα感受性株、耐性株の既知のIFNαシグナル伝達分子Jak、TyK、STAT1、STAT2、ISGF3の発現をPCR、ウェスタンブロットにて検討した。またIFNα1,000IU/ml加に培養し、3、6、12、24時間後の遺伝子発現の経時的変化を20,000クローンのマイクロアレイ(CodeLink社)により網羅的に検索し、GeneSpringを使用して解析した。
結果:(1)臨床的検討:腎癌組織と正常腎の遺伝子発現profileでは、これら2群を明らかに分類できる遺伝子セットが洗たくできた。これらの腎癌で発現の亢進している遺伝子セットの中でさらにIFNα反応性との関係を検討した。IFNαを腎癌転移巣4例に治療投与したところ、2例に有効、2例に進行を認めた。これら2群を識別できる遺伝子セットの選択が可能であり、IFNαの有効性を予測する可能性が示唆された。一方、(2)基礎的検討ではIFNαの添加により、感受性株SKRC-17、-59において、耐性株SKRC-12、-33には認められない3遺伝子の経時的発現増加が認められた。これらの遺伝子の中にはすでにIFNαにより誘導される遺伝子が含まれており、腎癌細胞のIFNα感受性に関連する分子である可能性が示唆された。さらにこれらの遺伝子発現を定量的に確認し、発現量の制御とIFNα感受性の変化を検討する予定である。

Research Products

• [Publications] 鳥居 徹, 他: "進行腎癌に対するインターフェロンα治療テーラーメイド化のための基礎的検討"癌の臨床. 50. 7-13 (2004)
• [Publications] Shimazui T, et al.: "Alteration of gene expression in association with sensitivity of interferon-alpha detected by cDNA macroarray"AUA Program Abstract. 169. 205-205 (2003)