胎盤トロフォブラスト合胞体化の分子生物学的機序の解析:妊娠中毒症発症病態の解明

2003 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 15591752
• Research Institution: Hiroshima University
• Principal Investigator: 工藤 美樹 広島大学, 医学部・歯学部附属病院, 助手 (80241082)
• Keywords: 胎盤 / トロフォブラスト / 合胞体化 / 細胞融合 / アミノ酸輸送 / 妊娠中毒症

Research Abstract

ヒト胎盤におけるシンシテオトロフォブラストの形成過程が膜表面タンパクであるCD98により制御されているかどうか、およびシンシチオトロフォブラスト形成過程とアミノ酸輸送活性に関連があるかどうかをトロフォブラストのシンシチウム化のモデルであるBeWo細胞(forskolin添加により細胞内cyclicAMPレベルを上昇させるとシンシチウム化が誘導される)を用いて検討した。その結果、1)シンシチウム化に伴ってCD98の発現はmRNAレベル(RT-PCR法)、タンパクレベル(ウエスタンブロット法)共に経時的に上昇していた。2)アンチセンス法を用いてCD98の発現を抑制するとシンシチウム化(研究者らが開発したフローサイトメーターを用いたシンシチウム化の定量的測定系を用いて測定)は抑制され、シンシチウム化の古典的マーカーであるhuman chorionic gonadotropinの分泌(EIA法)も低下した。3)CD98が関与しているアミノ酸輸送系であるシステムL、システムy^+Lを介するアミノ酸輸送活性(放射標識されたアミノ酸を基質として非標識アミノ酸を用いた交差阻害実験)はシンシチウム化に伴って上昇した。アンチセンスオリゴで細胞を処理すると、これらの輸送系を介するアミノ酸輸送活性は低下した。これらの結果より、CD98がシンシテオトロフォブラストの形成過程に関与していることが判明した。さらに、シンシテオトロフォブラストの重要な機能のひとつであるアミノ酸輸送活性はシンシチウム化に伴って上昇することが証明された。

Research Products

• [Publications] 工藤 美樹: "Quantifying the syncytialisation of human placental trophoblast BeWo cells grown in vitro"Biochimica et Biophysica Acta. 1640. 25-31 (2003)
• [Publications] 工藤 美樹: "Manipulation of CD98 expression affects both trophoblast cell fusion and amino acid transport activity during syncytialisation of human placental BeWo cells"Journal of Physiology. 550. 3-9 (2003)
• [Publications] 工藤 美樹: "Quantifying the syncytialisation of a human placental trophoblast cell line (BeWo) grown in vitro and effects thereon of manipulation of CD98 expression"Placenta. 24. A59 (2003)
• [Publications] 工藤 美樹: "An analysis using DNA microarray of the time course of gene expression during syncytialisation of a human placental cell line (BeWo)"Placenta. (in press).