2004 Fiscal Year Annual Research Report
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15591809
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| Research Institution | KYOTO UNIVERSITY |
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Principal Investigator |
藤野 清大 京都大学, 医学研究科, 助手 (50359832)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
中川 隆之 京都大学, 医学研究科, 助手 (50335270)
辻 純 京都大学, 医学研究科, 講師 (30252448)
喜多 知子 京都大学, 医学研究科, 研究員(科学技術振興)(常勤形態) (20362519)
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| Keywords | Notch情報伝達系 / RBP-J / Cre-loxP / Wnt情報伝達系 / GSK-3β / 内耳有毛細胞 |
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| Research Abstract |
1)Notch情報伝達系転写因子RBP-Jの遺伝子的阻害実験
細胞の分化にかかわるNotch情報伝達系の転写因子、RBP-Jをマウス内耳器官培養中でアデノウイルスベクター、Cre-loxPシステムを用いてコンディショナルノックアウトした。その結果、有毛細胞の異所性増殖を達成した。
2)Notch情報伝達系転写因子RBP-Jの薬剤による阻害実験
上記Notch情報伝達系の転写因子RBP-Jの阻害剤、γセクレターゼ阻害剤の投与により有毛細胞の増殖を図る。生後3日齢マウス内耳の器官培養を作製し、γセクレターゼ阻害剤を投与した。1週間の培養により、有毛細胞の異所性増殖を達成した。
3)Wnt情報伝達系の転写因子GSK-3βのコンディショナルノックアウト
細胞の分化・増殖にかかわるWnt情報伝達系を遺伝子的に操作した。β-カテニン安定化マウス(本学遺伝薬理学講座 武藤誠研究室より供与)の内耳を摘出し、器官培養する。アデノウイルスベクターを本マウスに組み込まれたCre-loxPシステムに作用させ、β-カテニンの分解因子GSK-3βがノックアウトする。これによりβ-カテニンの細胞内濃度が上昇し、核内に移行して細胞増殖が開始される。その結果結果でも有毛細胞の異所性増殖所見を得た。
4)Wnt情報伝達系の転写因子GSK-3βの薬剤による阻害実験
上記β-カテニンの分解因子、GSK-3βを薬剤的に阻害する。代表的な阻害剤3種(Indirubin-3' -monoxime、(2'Z,3'E)-6-Bromoindirubin-3'oxime (BIO)、Kenpaullone)をマウス器官培養に投与した。前二者の投与によって有毛細胞の異所性増殖所見を得た。
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Research Products
(4 results)
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[Journal Article] Expression of calretinin by fetal otocyst cells after transplantation into damaged rat utricle explants.2004
Author(s)
Kim TS, Kojima K, Nishida A, Tashiro K, Lee JE, Fujino K, Nakagawa T, Iguchi F, Endo T, Naito Y, Omori K, Lefebvre PP, Ito J.
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Journal Title
Acta Otolaryngol Suppl 551
Pages: 34-38
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[Journal Article] Transplantation of bone marrow stromal cells into the cochlea of chinchillas.2004
Author(s)
Naito Y, Nakamura T, Nakagawa T, Iguchi F, Endo T, Fujino K, Kim TS, Hiratsuka Y, Tamura T, Kanemaru S, Shimizu Y, Ito J.
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Journal Title
NeuroReport 15
Pages: 1-4
