2004 Fiscal Year Annual Research Report
反回神経損傷後の疑核における神経細胞再生関連遺伝子の検索
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15591827
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| Research Institution | Kyoto Prefectural University of Medicine |
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Principal Investigator |
宇野 敏行 京都府立医科大学, 医学研究科, 助教授 (70254349)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
久 育男 京都府立医科大学, 医学研究科, 教授 (50181087)
矢追 毅 京都府立医科大学, 医学研究科, 助手 (40311914)
鈴木 敏弘 京都府立医科大学, 医学研究科, 助手 (20275225)
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| Keywords | 疑核 / 喉頭 / 反回神経 / 神経再生関連因子 / 単一細胞PCR |
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| Research Abstract |
1.疑核運動神経細胞の単離技術の確立
蛍光神経トレーサーDiIをラット内喉頭筋に注入し、10日後標識された疑核運動神経細胞を、蛍光実体顕微鏡下にマイクロマニュピレーターを用いてトリミングし,標識細胞を単離回収することに成功した。
2.疑核単一運動神経細胞レベルにおけるPCR定量
DiIをラット内喉頭筋に注入し、10日後に反回神経を切断。一定期間の後に標識細胞を単離回収し、定量PCR法により神経突起伸長関連分子群の1つであるGAP-43mRNAの発現を単一細胞レベルで定量した。GAP-43mRNA発現レベルが反回神経切断後7日目で,非切断側に比べ約8倍上昇していた。この結果は,in situ hybridizationによる解析結果と一致すると考えられた。
3.JAK/STAT系を介した疑核細胞内シグナル伝達系の変化
神経傷害後に早い段階で見られるJAK/STAT系のシグナル伝達系の反応について、ラット反回神経傷害後の疑核運動神経細胞を用いて、STAT3蛋白の発現とそのリン酸化、核内への移行を明らかにした。
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