ラット下肢同種移植に於ける急性期拒絶反応メカニズムとアポトーシスに関する研究

2003 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 15591896
• Research Institution: Tohoku University
• Principal Investigator: 今井 啓道 東北大学, 医学部附属病院, 助手 (80323012)
• Keywords: ラット下肢移植 / 同種移植 / 同系移植 / 急性期拒絶反応 / ストレス応答 / heat shock protein 70

Research Abstract

1.動物実験
実験群(同種移植群:F344 to Lewis)および対照群(同系移植群:Lewis to Lewis)につきラット右下肢移植を行い、(1)皮膚軟部組織(2)膝関節(3)脛骨(4)脾臓(5)脳をサンプルとして、それぞれ術直後・術後1日・術後3日・術後7日・術後12日に採取した。Nは各期日につきそれぞれ10とし、そのうち5はパラフィン包埋標本、さらに5は凍結標本とした。
2.蛋白抽出
皮膚軟部組織につき、凍結標本より蛋白抽出を行った。これは今後Western blottingのサンプルとして使用される。
3.組織学的検索
HE染色標本について組織学的検索を行った。対照群では、術後経過上顕著な組織学的変化は認めなかった。実験群では、術後3日目からの皮下結合組織浮腫が顕著となり、術後7日目には著明な炎症細胞浸潤を認めた。表皮は術後7日目まで正常な形態を保ったが、術後12日目には表皮変性が顕著となり、また毛包等の皮膚付属器の変性も顕著となった。
4.免疫組織化学的検索
皮膚軟部組織につき、ラット下肢同種および同系移植急性期に於けるストレス応答を検索するため、heat shock protein 70に対する免疫染色を行った。表皮細胞および浅層毛包細胞では、実験群・対照群ともに術直後より陽性を示したが、対照群では以後顕著な変化は無かったのに対し、実験群では術後7日目までシグナルの増強を認め、表皮変性が顕著となる術後12日目には一転して陰性化した。また、実験群では、皮下結合組織浮腫に先立って、微小血管内皮細胞に陽性所見を認めた。