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2004 Fiscal Year Annual Research Report

骨芽細胞のアポトーシスにおける核蛋白ニュークレオリンの分解と蛋白質脱リン酸化酵素

Research Project

Project/Area Number 15591936
Research InstitutionThe University of Tokushima

Principal Investigator

羽地 達次  徳島大学, 大学院・ヘルスバイオサイエンス研究部, 教授 (50156379)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 森本 景之  徳島大学, 大学院・ヘルスバイオサイエンス研究部, 助手 (30335806)
Keywordsアポトーシス / 骨芽細胞 / ニュークレオリン / オカダ酸 / 蛋白質脱リン酸化 / RNAi
Research Abstract

蛋白質脱リン酸化酵素阻害剤オカダ酸はヒトおよびマウスの骨芽細胞にアポトーシスを誘導した。核小体にドット状に局在するニュークレオリンは蛋白質脱リン酸化酵素1δ型と結合する。正常細胞においてドット状に局在するニュークレオリンはアポトーシス細胞では分解されて核全体に拡散し,最終的には核から消滅した。ニュークレオリンは核と細胞質間のシャペル蛋白であり,細胞の生存や癌化に関連するリン酸化蛋白である。この蛋白のアポトーシスにおける動向を蛋白レベルで調べるために,正常細胞およびアポトーシス細胞から調製したタンパク質をSDS-PAGEで分離し,抗-ニュークレオリン抗体を用いてウエスタンブロット法で分析した。正常細胞では110kDaのニュークレオリンが検出されるが,アポトーシス細胞から調製したタンパク質では110kDaのタンパク量が減少し,新たに80kDaのタンパクが出現しその量が増加した。つまり,アポトーシスによりニュークレオリンは分解されて80kDaの断片になる。同様の結果はインビトロアポトーシス系においても認められた。蛋白質脱リン酸化酵素1δに特異的な塩基配列を有する2重鎖RNAを合成して,RNAiを行うと他のPP1(PP1α,PP1γ-1)の発現は抑制を受けなかったが,PP1δの発現は著しく抑制された。また,PP1δのRNAiにより,ニュークレオリンの発現も減少した。以上の結果は,ニュークレオリンとアポトーシスには密接な関係にあり,その関係をPP1δが調節することを示唆している。

  • Research Products

    (6 results)

All 2005 2004 Other

All Journal Article (6 results)

  • [Journal Article] PTEN expression by Egr-1 transcription factor in calyculin A-induced apoptotic cells.2005

    • Author(s)
      Hirohiko Okamura
    • Journal Title

      Journal of Cellular Biochemistry 94

      Pages: 117-125

    • Description
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [Journal Article] Okadaic acid stimulates expression of Fas receptor and Fas ligand by activation of nuclear factor kappa-B in human oral squamous carcinoma cells2004

    • Author(s)
      Michi Fujita
    • Journal Title

      Oral Oncology 40

      Pages: 199-206

    • Description
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [Journal Article] Transcription factor NF-Y regulates mdr1 expression through binding to inverted CCAAT sequence in drug-resistant human squamous carcinoma cells2004

    • Author(s)
      Hirohiko Okamura
    • Journal Title

      International Journal of Oncology 25

      Pages: 1031-1037

    • Description
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [Journal Article] Double-stranded RNA mediates selective gene silencing of protein phosphatase type 1 delta isoform in HEK-293 cells2004

    • Author(s)
      Hiroyuki Morimoto
    • Journal Title

      Journal of Enzyme Inhibition and Medical Chemistry 19

      Pages: 327-331

    • Description
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [Journal Article] Okadaic acid induced apoptosis through double-stranded RNA-dependent protein kinase/eukaryotic initiation factor-2α pathway in human osteoblastic MG63 cells2004

    • Author(s)
      Hiroyuki Morimoto
    • Journal Title

      Journal of Biochemistry 136

      Pages: 434-438

  • [Journal Article] Association of protein phosphatase 1 delta with nucleolin in osteoblastic cells and cleavage of nucleolin in apoptosis-induced cells

    • Author(s)
      Tatsuji Haneji
    • Journal Title

      Acta Histochemica et Cytochemica (In press)

URL: 

Published: 2006-07-12   Modified: 2016-04-21  

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