2003 Fiscal Year Annual Research Report
葉緑体・ミトコンドリアゲノムBAC作成とオルガネラゲノム改変新技法の確立
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15651085
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| Research Institution | Hokkaido University |
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Principal Investigator |
多田 光宏 北海道大学, 遺伝子病制御研究所, 助教授 (10241316)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
西脇 森衛 先端科学技術共同研究センター, 研究員
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| Keywords | cell organella / mitochondria genome / chroloplast genome / bac vector / genome modification |
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| Research Abstract |
本研究ではミトコンドリアや葉緑体に存在する環状DNAゲノムに対し,これらのオルガネラに遺伝子を導入もしくは改変する新規の方法を開発することを目的とする.
本年度は以下のような研究を行った.
1)ミトコンドリアおよび葉緑体へベクターを直接導入するため,マイクロマニュピレータにて電極をいれた微小管を細胞に接触もしくは刺入し,電気穿孔法にて遺伝子担体を膜を通過させてオルガネラ中に導入する方法の検討を行った.その結果,細胞内への陽性荷電したベクターや色素の移行が効率的にみられた.しかし,ミトコンドリアや葉緑体への高濃度での移行はまだ証明されておらず,今後の検討課題である.
2)BAC vector中にヒトミトコンドリアゲノムをクローニングして,増幅可能なベクターとする研究を行い,クローニングに成功した.このベクターが導入された細胞内で機能を発揮するかは未確認であり,今後の研究課題である.
3)葉緑体ゲノムはミトコンドリアゲノムに対して大きく,葉緑体ゲノムを一塊としてベクター化するのではなく,葉緑体ゲノムARF部をもつvectorの開発を現在検討中である.
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Research Products
(6 results)
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[Publications] Kobayashi T, et al.: "Calcium-induced mitochondrial swelling and cytochrome c release in the brain : its biochemical characteristics and implication in ischemic neuronal injury."Brain Research. 960. 62-70 (2003)
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[Publications] Monti P, et al.: "Characterization of the p53 mutants ability to inhibit p73b transactivation using a yeast-based functional assay."Oncogene. 22. 5252-5260 (2003)
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[Publications] Lee J, et al.: "Migration and differentiation of nuclear fluorescence-labeled bone marrow stromal cells after transplantation into cerebral infarct and spinal cord injury in mice."Neuropathology. 23. 169-180 (2003)
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[Publications] Yamada H, et al.: "Reconstructed beta-catenin/TCF4 signaling in yeast applicable to functional evaluation of APC mutations."American Journal of Pathology. 163. 2201-2209 (2003)
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[Publications] Hirai A, et al.: "Expression of AIE-75 PDZ-domain Protein Induces G2/M Cell Cycle Arrest in Human Colorectal Adenocarcinoma SW480 Cells."Cancer Letters. in press. (2004)
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[Publications] Takahashi Y, et al.: "Expression profiles of 39 HOX genes in normal human adult organs and anaplastic thyroid cancer cell lines by quantitative real-time RT-PCR system"Experimental Cell Research. 293. 144-153 (2004)
