ソフトイオン化質量分析を用いた異常ヘモグロビンスクリーニング法の確立

2003 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 15790280
• Research Institution: Osaka Medical College
• Principal Investigator: 宮崎 彩子 大阪医科大学, 医学部, 助手 (20298772)
• Keywords: 質量分析 / 異常ヘモグロビン / ルーチン化 / スクリーニング / ソフトイオン化

Research Abstract

<対象>
H15年度中に学内外から依頼のあった異常ヘモグロビン症疑い症例22検体
<方法>
異常ヘモグロビンスクリーニング法
第1段階:短時間(数分)での異常Hbの有無の検出
a)陽イオン交換カラムを使用した異常Hbの検出
b)エレクトロスプレー質量分析(現有設備)を使用した検出
c)不安定性ヘモグロビンの検出(イソプロパノールテスト)
第2段階:検出された異常Hbの構造解析
1)変異成分の分離
2)酵素消化
3)質量分析器による変異部位およびアミノ酸の同定
4)DNAシークエンシングによる変異の確認
<結果>
第1段階で正常11検体、異常ヘモグロビン症6種11症例を検出した。
第2段階で異常ヘモグロビン症11症例の構造解析を行った。その結果、Hb Riyadh(β120 K→N)4症例、HbG-Szuhu(β80 N→K)2症例、Hb Hikari(β61 K→N)2症例、Hb Moriguchi(β97 H→Y)1症例、Hb Dofar(β58 P→R)1症例、Hb Toranomon(β112 C→W)1症例を同定した。Hb Toranomonは世界第一例のホモ接合体であった。

Research Products

• [Publications] A.Miyazaki, T.nakanishi, A.Shimizu, H.Hisamitsu: "The first case of a single heterozygote of an abnormal hemoglobin, Hb Stanmore,[β111(G13)Val→Ala]."Journal of Chromatography B. 792(1). 23-31 (2003)
• [Publications] A.Miyazaki, T.Nakanishi, A.Shimizu, K.Ninomiya, S.Nishimura, K.Imai: "HB BUZEN [β138(H16)Ala→Thr]. A new β variant."Hemoglobin. 27(4). 243-247 (2003)
• [Publications] K.Ogawa, T.Bando, M.Ogawa, A.Miyazaki, T.Nakanishi, A.Shimizu: "Hemoglobin variant HbG-Coushatta(β22 Glu→Ala) found by dissociation of blood glucose from values of HbA1c measured by HPLC."Internal Medicine. 42(9). 781-787 (2003)
• [Publications] K.Iguchi, T.Nakanishi, A.Miyazaki, A.Shimizu, A.Ota: "development of an isotope-dilution mass spectrometric assay for HbA1c based on enzyme-cleaved peptide analysis."Journal of Chromatography B. (in press).