肥大心におけるLysyl oxidase familyの役割に関する検討

2003 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 15790402
• Research Institution: Kurume University
• Principal Investigator: 宮崎 宏 久留米大学, 医学部, 助手 (90343699)
• Keywords: 心肥大 / 細胞外マトリックス / Lysysl oxidase / 心筋細胞 / ラット

Research Abstract

Lysyl oxidase familyは、コラーゲンやエラスチンの架橋反応を担う酵素であり、細胞外マトリックスの形成に重要である。我々は、DNA chipを用いた検討で圧負荷心肥大および容量負荷心肥大の両者で、lysyl,oxidase like-2(LOXL2)の発現が亢進していることを見いだした。不検討では肥大心でのlysyl oxidase familyの発現変化とその意義の解明を目的とする。今年度は、LOXL2の発現パターンや発現調節機構を検討した。ラットの圧負荷心肥大モデルでは、LOXL2の発現は7日から発現亢進がみられ、14,28日と発現が増大した。ラットの初代培養心筋細胞や心筋細胞セルラインであるH9C2細胞で、LOXL2の発現が確認され、心筋細胞自体にも発現していることがわかった。また液性因子による発現調節としては、norepinephrine, angiotensin II, endothelin-1のそれぞれで心筋細胞肥大に伴い濃度依存性に発現亢進がみられた。従ってLOXL2は、(1)正常心筋細胞で発現している、(2)圧負荷、容量負荷、ホルモン刺激を問わず肥大心で発現亢進がみられる、(3)心筋細胞においては、少なくともGq依存性アゴニスト刺激により、細胞肥大と共に発現が亢進する、の3点が明らかとなった。さらにlysyl oxidase family(LOXL1,2,3)のクローニングを行い、Gateway systemを用いてほ乳類発現ベクター、大腸菌発現ベクターを構築した。来年度はLOXL2が肥大心で発現が亢進する意義を、大腸菌を用いた発現系、アデノウイルスを用いた心筋細胞発現系、siRNAなどを用いて検討する。

Research Products

• [Publications] 宮崎 宏: "圧負荷と容量負荷心肥大における遺伝子発現の差異の検討-Metallothionein-1の心肥大における役割について-"平成15年度特発生心筋症調査研究報告書. (印刷中). (2004)
• [Publications] 宮崎 宏: "Gene Expression Profiling in Pressure or Volume Overload Myocardial Hypertrophy in Rats,-Study with DNA chip-"Circulation Journal. 67. 541-542 (2003)
• [Publications] Miyazaki H.: "Gene Expression Profiling in Pressure or Volume Overload Myocardial Hypertrophy in Rats-Study with DNA Chip-"American Heart Association, Scientific Conference on Advances in the Molecular and Cellular Mechanisms of Heart Failure. 19 (2002)
• [Publications] Koga A, Miyazaki H, et al.: "Adenovirus-Mediated Overexpression of Caveolin-3 Inhibits Rat Cardiomyocyte Hypertrophy"Hypertension. 42. 213-219 (2003)
• [Publications] Koga A, Miyazaki H, et al.: "Overexpression of Dominant Negative Caveolin-3 Alters Hypertrophic Responses to Endothelin-1 in Rat Cardiomyocytes"Circulation. 106. II-291 (2002)
• [Publications] 岡 直樹, 宮崎 宏 他: "外来診療のすべて(改訂第3版)"メジカルビュー社. 2 (2003)