2003 Fiscal Year Annual Research Report
新しい動脈硬化診断指標:キャピラリーITP法での血中酸化LDL測定確立と臨床意義
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15790403
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Research Institution | Fukuoka University |
Principal Investigator |
瀬川 波子 福岡大学, 医学部, 助手 (80352251)
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Keywords | 酸化LDL / キャピラリー等速電気泳動 / リポ蛋白分画 / Negative charge / 変性LDL / Native LDL / Cu^<2+>による酸化 / Apo B除去血漿 |
Research Abstract |
血液中に酸化LDL・糖化LDLなどを含む変性LDLが存在する。これらの変性LDLはnegative chargeを有するという共通の特性を持つ。私達はこの特性を利用したキャピラリー等速電気泳動(cITP)法による血中における動脈硬化性のLDL分画を測定する方法とその意義を検討している。平成15年度には、cITP法によるLDL亜分画測定法の精度、cITP LDL定量とLDL蛋白量の関係及びcITP LDL亜分画と酸化の関係を検討した。 血漿サンプルはNBD-ceramideで染色し、アミノ酸ミックスを加えた後、leading bufferとterminating bufferの間に注入することによりリポ蛋白亜分画をBeckmanのMDQ/PACE systemを用いて分離・測定した。ヒト血漿リポ蛋白はcITP法によって3つのHDL分画、1つのchylomicron/remnant分画、1つのVLDL/IDL分画と、2つのLDL分画に分離した。cITP HDL分画はアポ蛋白B除去血漿(HDL分画)を分析することにより、またcITP LDL分画は超遠心により分離したLDLをアポ蛋白B除去血漿に加えて分析することによって確認した。LDL分画のintra-assayとinter-assay variationはそれぞれ10%と20%以下であった。 cITP法によりLDLはmodified LDL (mLDL)とnative LDL (nLDL)亜分画に分離される。cITP mLDLとnLDL下の面積はそれぞれLDLの蛋白量と比例していた。 超遠心により分離したLDLをCu^<2+>により酸化させた後、HDL分画と混和しcITP分析をすることによって酸化によるcITP LDL亜分画分布の変化を観察したところ酸化によりcITP nLDL分画が減少し、cITP mLDL分画が増加した。つまり、nLDL分画は酸化過程中にmLDLに変換された。このことは、体内に存在する酸化LDLをcITP mLDLとして測定できることを示した。
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Research Products
(6 results)
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[Publications] Shimoji E, Zhang B, et al.: "Inhibition of cholesteryl ester transfer protein increases serum apolipoprotein (apo) A-I levels by increasing the synthesis of apo A-I in rabbits"Atherosclerosis. 172. 247-257 (2004)
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[Publications] Zhang B, et al.: "Effect of atorvastatin on total lipid profiles assessed by analytical capillary isotachophoresis"Cardiology. 99. 211-213 (2003)
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[Publications] Zhang B, et al.: "Paraoxonase (Pon1) Q192R polymorphism and serum Pon1 activity in diabetic patients on maintenance hemodialysis"Clinical Nephrology. 60. 257-265 (2003)
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[Publications] Zhang B, et al.: "Multivariate analysis of the prognostic determinants of the depressor response to exercise therapy in patients with essential hypertension"Circulation Journal. 67. 579-584 (2003)
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[Publications] Zhang B, et al.: "Evaluation of apolipoprotein A-I kinetics in rabbits in vivo using in situ and exogenous radioiodination methods"Lipids. 38. 209-218 (2003)
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[Publications] Zhang B, et al.: "The I allele of the angiotensin-converting enzyme gene is associated with an increased percentage of slow-twitch type I fibers in human skeletal muscle"Clinical Genetics. 63. 139-144 (2003)