2003 Fiscal Year Annual Research Report

新たな膜輸送機構の分子基盤

Research Project

Project/Area Number	15GS0301
Research Institution	Akita University
Principal Investigator	稲垣暢也秋田大学, 医学部, 教授 (30241954)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	植田和光京都大学, 大学院・農学研究科, 教授 (10151789) 山田勝也秋田大学, 医学部, 助手 (40241666) 坂信広秋田大学, 医学部, 助手 (90333921) 加藤博章京都大学, 大学院・薬学研究科, 教授 (90204487)
Keywords	遺伝子 / 蛋白質 / 脂質 / ABC蛋白質 / 膜輸送 / イオンチャネル
Research Abstract	哺乳動物のABC蛋白質は未だに蛋白構造が不明であるだけでなく、その多くは未だに輸送する基質や機能、病態との関連が不明である。本研究では、特にABC蛋白質のレギュレーター機能(SUR)と脂質膜輸送機能(ABCAサブファミリー)に焦点を絞り、構造、機能、病態における意義を解析することにより、新たな膜輸送機構の分子基盤を明らかにすることを目的とする。平成15年度には、1)SUR1/Kir6.2チャネルの欠損(KO)マウスを用い、低酸素条件下におけるあえぎ呼吸の形成に異常があることを明らかにした。 2)SUR2B/Kir6.1チャネルのKOマウスが、ある条件下では神経刺激-脳局所血流連関に異常を来すことを明らかにした。 3)ABCA3の発現調節機構を明らかにした。 4)マウスABCA14を新規に単離し、ABCA14が精巣の精子あるいは精子細胞特異的に発現していることを明らかにした。 5)ABCA3ならびにABCA14のターゲティングベクターを作成した。 6)ABCA2 KOマウスのミエリンの形態学的解析を行った。KOマウスにおいて特にミエリン形成異常は認められなかった。 7)精製ABC蛋白質を用いたATPase活性のマイクロアッセィ系を確立した。 8)ABCA1とα1-syntrophinの相互作用の発見とABCA1の翻訳後活性制御への関与を明らかにした。 9)バキュウロウィルス・昆虫細胞系を用いたABC蛋白質の大量発現系を確立した。最終的にABCA1を約90%の純度で精製できた。SUR1に関しては可溶化率が悪く、さらなる条件の検討が必要である。 10)バキュウロウィルス・昆虫細胞系を用いて、X線結晶解析に適したヒトMDR1の調製を試みた。最終的に約100mgの精製MDR1の調製が可能となり、さらに、タンパク質の可溶化とタンパク質の安定化を同時に達成可能な界面活性剤の探索に成功した。

Research Products

(7 results)

All Other

All Publications (7 results)

[Publications] Munehira, Y., et al.: "α1-syntrophin modulates turnover of ABCA1."J.Biol.Chem.. (in press). (2004)
[Publications] Abe-Dohmae, S., et al.: "Human ABCA7 supports apolipoprotein-mediated release of cellular cholesterol and phospholipid to generate HDLA."J.Biol.Chem.. 279. 604-611 (2004)
[Publications] Tanaka, Y., et al.: "Temporal and spatial profiles of ABCA2-expressing oligodendrocytes in the developing rat brain."J.Comp.Neurol.. 455. 353-367 (2003)
[Publications] Tanaka, A.R., et al.: "Effects of mutations of ABCA1 in the first extracellular domain on subcellular trafficking and ATP binding/hydrolysis."J.Biol.Chem.. 278. 8815-8819 (2003)
[Publications] Shitan, N., et al.: "Involvement of CjMDR1, a plant MDR-type ABC protein, in alkaloid transport in Coptis japonica."Proc.Natl.Acad.Sci.USA.. 100. 751-756 (2003)
[Publications] Yamauchi, E., et al.: "Crystal structure of a MARCKS peptide containing the calmodulin-binding domain in complex with Ca(2^+)-calmodulin."Nature Struct.Biol.. 10. 226-231 (2003)
[Publications] Matsuo, M., Ueda, K., Ryder, K., Ashcroft, F.: "The sulphonylurea receptor : An ABCC transporter that acts as an ion channel regulator. In : Holland, IB ed. ABC proteins."Academic Press.. 647 (2003)

2003 Fiscal Year Annual Research Report

新たな膜輸送機構の分子基盤

Principal Investigator

稲垣 暢也 秋田大学, 医学部, 教授 (30241954)

Research Products

[Publications] Munehira, Y., et al.: "α1-syntrophin modulates turnover of ABCA1."J.Biol.Chem.. (in press). (2004)

[Publications] Abe-Dohmae, S., et al.: "Human ABCA7 supports apolipoprotein-mediated release of cellular cholesterol and phospholipid to generate HDLA."J.Biol.Chem.. 279. 604-611 (2004)

[Publications] Tanaka, Y., et al.: "Temporal and spatial profiles of ABCA2-expressing oligodendrocytes in the developing rat brain."J.Comp.Neurol.. 455. 353-367 (2003)

[Publications] Tanaka, A.R., et al.: "Effects of mutations of ABCA1 in the first extracellular domain on subcellular trafficking and ATP binding/hydrolysis."J.Biol.Chem.. 278. 8815-8819 (2003)

[Publications] Shitan, N., et al.: "Involvement of CjMDR1, a plant MDR-type ABC protein, in alkaloid transport in Coptis japonica."Proc.Natl.Acad.Sci.USA.. 100. 751-756 (2003)

[Publications] Yamauchi, E., et al.: "Crystal structure of a MARCKS peptide containing the calmodulin-binding domain in complex with Ca(2^+)-calmodulin."Nature Struct.Biol.. 10. 226-231 (2003)

[Publications] Matsuo, M., Ueda, K., Ryder, K., Ashcroft, F.: "The sulphonylurea receptor : An ABCC transporter that acts as an ion channel regulator. In : Holland, IB ed. ABC proteins."Academic Press.. 647 (2003)

稲垣暢也秋田大学, 医学部, 教授 (30241954)