2017 Fiscal Year Annual Research Report
Analysis of physiological roles of the Plant post-Golgi organelle in stress response.
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15H04627
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Research Institution | Ochanomizu University |
Principal Investigator |
植村 知博 お茶の水女子大学, 理系女性教育開発共同機構, 准教授 (90415092)
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Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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Keywords | TGN / SNARE |
Outline of Annual Research Achievements |
・TGNが関与する高塩ストレスの「受容」と「応答」を単離することによる、高塩ストレス応答の分子メカニズムの解明:TGNに局在するNa/Hアンチポーターの局在を観察すためNHX5/NHX6にGFP, YFP, mRFPを融合させたタンパク質を発現する形質転換体を作出し、TGN機能が損なわれた変異体syp4にNHX5-GFP, NHX6-GFPを発現する形質転換体も作出した。塩ストレス処理後の挙動について解析を行い、野生型ではNHX5/6が塩処理後に液胞膜に局在を変えるが、変異体ではその局在変化が起こらないことを発見した。 ・塩ストレス応答におけるオルガネラ動態の解明:各ポストゴルジオルガネラの塩ストレス応答時の挙動を観察した。その結果TGNが小さくなっていることが確認された。超高感度高速のライブイメージング顕微境を用いて長時間の塩ストレス応答の観察システムの構築を試みたが、長時間同じ細胞を観察することができなかった。H29年度は超解像ライブイメージング顕微鏡ではない顕微鏡をもちいて、塩処理開始から6時間は観察する実験システムを構築した。 ・病原菌抵抗性におけるTGNのダイナミクスと生理機能の解明:シロイヌナズナに感染することが出来ないうどんこ病菌(Blumeria graminis)を用いて、syp4変異体でのうどんこ病菌に対する応答を詳細に解析した。その結果、ゴルジ体から独立したTGNが分泌経路で機能することを見出した。また、病原菌侵入時の分泌タンパク質を同定するために、細胞間隙のタンパク質を単離しプロテオミクス実験を行い、バイオインフォマティック的解析により数種類の候補分泌タンパク質を同定した。
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Research Progress Status |
平成29年度が最終年度であるため、記入しない。
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Strategy for Future Research Activity |
平成29年度が最終年度であるため、記入しない。
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Research Products
(6 results)