2018 Fiscal Year Annual Research Report
Regulatory mechanism of immunoglobulin diversification and genome instability through RNA-editing by AID
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15H05784
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| Research Institution | Kyoto University |
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Principal Investigator |
本庶 佑 京都大学, 高等研究院, 特別教授 (80090504)
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2015-05-29 – 2019-03-31
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| Keywords | DNA切断 / 組換え / 獲免免疫 / 免疫記憶 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
（RNA編集の直接的証明）AIDによる抗体遺伝子組換えを起こすB細胞株のRNAシーケンスを行い、AIDの有無により比較した。EspnをコードするRNAの特定のアイソフォームでRNA編集を発見し機能を解析した。また、AIDの免疫沈降で得たAID結合RNAをシーケンスし、転写メディエーター複合体を構成する分子mRNAにRNA編集を認めた。当該分子はCSRに必要であり、そのRNA編集の機能を解析している。
（抗体遺伝子組換えにおけるRNA結合タンパク質の貢献）AID依存性DNA組換えに必要なhnRNP KとhnRNP Lについて解析した。hnRNP Kのドメイン解析を行ったところ、KHドメイン中のGXXGモチーフと結合ドメイン中のRGGモチーフはCSRと体細胞変異で異なる機能を持つことが明らかになった。一方、hnRNP Lは４つのRRMドメインのうち第２、第３ドメイン、特にベータシート構造が重要であることを見出した。
（AIDによるDNA切断の分子機構）AIDはトポイソメラーゼ１を制御しDNAを切断し、抗体遺伝子組換えを起こす。トポイソメラーゼ１(Top1)の3’UTR領域ノックアウト細胞ではこの組換え効率が低く、Top1タンパク質が増加していた。AIDによるTop1の制御は3’UTRへのmiRNA結合によると考えられた。現在miRNAの同定を行なっている。
（抗体遺伝子クロマチン構造の解析）CSRに必要なスプライス因子Phf5aは、ヒストンH2Aバリアントのp400依存的な抗体遺伝子への集積を制御する。Phf5aのDNA修復における新たな機能を発見した。
（細胞内dNTP量のCSRへの影響解明）dNTPaseであるSAMHD1の欠損によりdNTPが過剰となり、DNAポリメラーゼやDNA/RNAヘリカーゼが阻害されCSRが減少する。細胞内dNTPプールのCSRへの影響を初めて証明した。
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| Research Progress Status |
平成30年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
平成30年度が最終年度であるため、記入しない。
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Research Products
(9 results)
