2016 Fiscal Year Research-status Report
ケトン体代謝を介したグリア系3細胞の統合的制御による新規脳梗塞治療開発
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15K09324
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| Research Institution | Keio University |
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Principal Investigator |
高橋 慎一 慶應義塾大学, 医学部(信濃町), 准教授 (20236285)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
安部 貴人 慶應義塾大学, 医学部(信濃町), 講師(非常勤) (30365233)
中原 仁 慶應義塾大学, 医学部(信濃町), 助教 (60537950)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | アストロサイト / オリゴデンドロサイト / 髄鞘イメージング |
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| Outline of Annual Research Achievements |
ラット由来の初代培養ニューロンを培養プレート底面にて培養し、プレートインサート底面には培養アストログリア（約10％のミクログリアを含有）、および化学的（ara-C + LME）ミクログリア除去法にてミクログリアを含まない純粋アストログリア、さらにミクログリアのみの単独培養（少数のアストログリアを含む）を準備した。4.5時間のOGD（無グルコース + 1％酸素）負荷をかけ、通常の培養条件に復した後24時間におけるニューロンの生存率をLDHアッセイ、ABアッセイにて定量した。ミクログリア単独ではニューロンの生存率はコントロールに比して低下し、アストログリア存在下、さらにミクログリアの併存がニューロンの生存率を上昇させた。培地にはケトン体合成に必要なパルミチン酸を添加後には、ミクログリアを含まない純粋アストログリアでもニューロン保護作用を認めた。
当施設の倫理審査で承認された臨床研究計画に基づき、神経内科外来患者に対して書面同意を取得の後、ミエリンマップを含むルーチンのシーケンスの頭部MR（一部Gd造影あり）を実施した。対象患者は頭痛、めまいなどの愁訴にて当院神経内科外来に通院中、もしくは初診の患者であり、神経学的局在徴候を認めず、認知機能正常の患者である。また通常の心血管疾患の危険因子を有さず、抗血栓療法を受けていない患者から、通常のシーケンスからMR上無症候ラクナ、白質病変を有する患者を選別した。同時に撮像された「ミエリンマップ」では、FLAIR画像にて描出された白質病変には全例で髄鞘密度の低下が確認された。一部の病変ではFLAIR画像の病変に比して髄鞘脱落はより広範であった。Gdによる造影効果は認めなかった。FLAIR画像による病変とミエリンマップによる病変の両者の間で継時的に変化が生じるか否かは現在解析中である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
培養細胞を用いたアッセイ系でアストログリアとミクログリアの相互連関についてニューロンへの保護作用として証明した。
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| Strategy for Future Research Activity |
アストログリア特異的ケトン体産生能欠損マウスを用いたin vitroアッセイおよびin vivo脳梗塞モデルによる研究を進める。
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| Causes of Carryover |
アストロサイト特異的ケトン体産生能欠損マウスの飼育について、予定した学内の動物センターでの飼育委託（有料）を使用せず、自前研究室内での飼育が可能であったため、この部分の予算を計上せず翌年度に持ち越した。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
本年度からは、上記の施設を当初予定のとおりの共同利用施設に変更するため、予算執行に組み入れる。最終年度である本年に研究が終了した際には、マウス飼育を一時中断し、凍結杯保管を行う可能性があり、この予算にも充当する。
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[Journal Article] Application of q-Space Diffusion MRI for the Visualization of White Matter.2016
Author(s)
Kanehiro Fujiyoshi, Keiogo Hikishima, Jin Nakahara, Osahiko Tsuji, Junichi Hata, Tsunehiko Konomi, Toshihiro Nagai, Shinsuke Shibata, Shinjiro Kaneko, Akio Iwanami, Suketaka Momoshima, Shinichi Takahashi, Masahiro Jinzaki, Norihiro Suzuki, Masaya Nakamura, Yoshiaki Toyama, and Hideyuki Okano
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Journal Title
J Neurosci
Volume: 36
Pages: 2796-2808
DOI
Peer Reviewed / Int'l Joint Research
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