2015 Fiscal Year Research-status Report
NFκB活性化分子を標的とした新たな子宮内膜症治療
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15K10671
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| Research Institution | Tottori University |
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Principal Investigator |
原田 省 鳥取大学, 医学部, 教授 (40218649)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
谷口 文紀 鳥取大学, 医学部, 准教授 (40322218)
伊澤 正郎 鳥取大学, 医学部, 特任教授 (50032222)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | 子宮内膜症 / 子宮内膜症細胞 / 卵巣チョコレート嚢胞 / NFκB / TAK1 / IAP |
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| Outline of Annual Research Achievements |
子宮内膜症は慢性炎症性疾患である。そこで、炎症の主要な調節因子であるNFkBの活性化経路を担う分子であるTAK1とIAPをを標的とした新しい薬物療法開発を目指す。
本研究では、私どもが開発した子宮内膜症細胞(ESC)培養系と子宮内膜症マウスモデルを用いてNFkBの活性化経路で重要な分子をターゲットとして、子宮内膜症の発生・進展における役割を検討するとともに新規の薬剤開発に向けた基盤研究を行う。
子宮内膜症病変から採取した細胞を用いてTAK1およびIAP阻害剤の効果を検討する。手術患者の同意を得て、摘出された卵巣チョコレート嚢胞壁からESCを分離・培養する。TAK1阻害剤としてはTAK1 siRNAを、IAP阻害剤としてはBV6を用いた。コントロールとしてNFkB 阻害作用を有するParthenolideを用いた。ESCの培養系に、それぞれの化合物を添加培養後48から72時間で細胞を採集してRNAを採取した。IL-6およびIL-8遺伝子は、RT-PCRを行い発現量を検討した。IL-6およびIL-8蛋白発現に及ぼす影響を細胞培養上清中のサイトカイン濃度をELISA法により測定した。また、細胞増殖への影響は、細胞内へのBrdUの取り込み量を検討した。
TAK1 siRNAおよびBV6(0-5uM)は、濃度依存性にIL-6およびIL-8遺伝子と蛋白発現量を低下させた。また、Parthenolideと同様に細胞増殖を抑制した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
子宮内膜症病変から採取した細胞を用いて、siRNA及びIAP阻害剤によるTAK1およびIAP機能の阻害が子宮内膜症細胞(ESC)のサイトカイン産生と増殖を抑制することが確認できたことから、今後は新規のTAK1およびIAP阻害剤を用いて実験を進める予定である。
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| Strategy for Future Research Activity |
子宮内膜症細胞(ESC)培養系と子宮内膜症マウスモデルを用いてNFkBの活性化経路であるTAK1およびIAP阻害が、ESCのサイトカイン産生と増殖を抑制することが確認できた。そこで、今後は、TAK1およびIAP阻害剤のIL-6およびIL-8遺伝子発現に対する作用をTAK1阻害剤としては、NG25, 5-Z-7-oxozeaenol, N-Des(aminocarboxyl)AZ、Birinapant, GDC-0152など、IAP阻害剤としてはAT-406, LCL-161, TL-32711などを用いて検討する。ESCにおけるIL-6ならびにIL-8の蛋白産生を指標として、有効な化合物をスクリーニングする。有効性がみられた化合物については、遺伝子及び蛋白発現を詳細に検討する。さらに、安全性を考慮した上でマウス動物モデルでの検討の準備を行う予定である。
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| Causes of Carryover |
子宮内膜症病変から採取した細胞を用いて、siRNA及びIAP阻害剤によるTAK1およびIAP機能の阻害が子宮内膜症細胞(ESC)のサイトカイン産生と増殖を抑制することが確認できたが、新規の薬剤を使用する実験への移行が遅れたため次年度使用を申請した。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
今後は、TAK1およびIAP阻害剤のIL-6およびIL-8遺伝子発現に対する作用をTAK1阻害剤としては、NG25, 5-Z-7-oxozeaenol, N-Des(aminocarboxyl)AZ、Birinapant, GDC-0152など、IAP阻害剤としてはAT-406, LCL-161, TL-32711などを購入する予定であり、またELISAキットなどの購入が必要となる。
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Research Products
(3 results)
