2017 Fiscal Year Annual Research Report
Development of novel dental pulp preservation and calcification therapies by analyzing epigenetics and post-transcriptional regulation mechanism
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15K11117
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| Research Institution | The University of Tokushima |
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Principal Investigator |
湯本 浩通 徳島大学, 大学院医歯薬学研究部(歯学系), 教授 (60284303)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
松尾 敬志 徳島大学, 大学院医歯薬学研究部(歯学系), 教授 (30173800)
中西 正 徳島大学, 大学院医歯薬学研究部(歯学系), 准教授 (00217770)
平尾 功治 徳島大学, 大学院医歯薬学研究部(歯学系), 助教 (00581399)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | 象牙芽細胞 / VEGF / 遺伝子発現 / シグナル伝達 / ポリフェノール |
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| Outline of Annual Research Achievements |
前年度までに、ポリフェノールの一種でプロポリス生理活性物質であるCaffeic Acid Phenethyl Ester (CAPE)が、ラット象牙芽細胞株 (KN-3)においてNOD1特異的リガンド(iE-DAP)刺激により誘導されるケモカイン産生を抑制することを報告した。さらに今年度は、主に以下の件空制化を得た。
1. KN-3細胞において、real-time PCRの結果、Epigallocatechin-3-gallate (EGCG)やCaffeic Acid処理では、Vascular Endothelial Growth Factor (VEGF) mRNAの発現増強は認められなかったが、CAPE処理では、有意なVEGF mRNAの発現増強が認められた。
2. ELISA法においても同様に、KN-3細胞において、CAPE処理のみ培養上清中のVEGF濃度の増加を認めた。さらに、石灰化誘導培地 (1% Fetal Bovine Serum, 10 mM b-glycerophosohateならびに50 microgram/ml アスコルビン酸を添加)を用いたKN-3細胞においても培養上清中のVEGF産生増加が認められた。
3. GFPレポーターシステムを用いた解析により、KN-3細胞をCAPE処理することにより、NF-kBの転写因子活性が有意に増強された。
4. KN-3細胞におけるCAPE処理によるVEGF産生は、p38 mitogen activated protein kinase (MAPK)およびNF-kB阻害剤添加により有意に減少した。
5. 骨芽細胞様細胞株(MC3T3-E1)細胞においても、KN-3細胞と同様に、CAPE処理群においてのみ培養上清中のVEGF濃度の増加を認め、さらにCAPE処理によるVEGF産生は、ERK1/2、p38 MAPK、JNK阻害剤を添加した群において有意に減少した。
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