2017 Fiscal Year Annual Research Report
Development of novel therapeutic methods for malignant tumors targeting PDE2 gene mutation
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15K11241
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| Research Institution | Mie University |
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Principal Investigator |
村田 琢 三重大学, 医学部附属病院, 講師 (80242965)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
清水 香澄 三重大学, 医学部附属病院, 助教 (20378368)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | phosphodiesterase / cAMP / melanoma |
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| Outline of Annual Research Achievements |
cAMPやcGMPの分解酵素であるPhosphodiesterase (PDE)はPDE1~11のファミリーにより構成されており，更に，各ファミリーにはAからD のサブタイプが存在する.これまでにわれわれは口腔由来悪性黒色腫細胞でPDE2が浸潤に関係し，PDE2遺伝子変異によりアミノ酸の変化が見られることを報告した．本変異と細胞浸潤の関係を調べるために，PDE2発現のない口腔悪性黒色腫細胞に野生型，あるいは，変異型PDE2を強制発現させて浸潤能への影響を解析した．導入の確認はリアルタイムPCR，免疫染色，PDE assay，western blottingで行い，マトリゲルインベージョンチャンバーを用いたinvasion assayで細胞浸潤の解析を行ったところ変異型PDE2導入群のみ細胞浸潤が増加していた．しかし，親細胞ではホモ野生型，ホモ変異型，ヘテロ変異型の３タイプが考えられたため浸潤細胞での高次構造解析や特異的複合体形成の研究の前に浸潤細胞の変異型について詳細に検討することが必要となった．マトリゲルインベージョンチャンバーを用いたinvasion assayで浸潤した各浸潤細胞はヘテロ変異型のみであった．また，野生型と変異型の遺伝子発現の割合はほとんどが変異型であり，各浸潤細胞でほぼ同様な割合であった．
次に，口腔悪性黒色腫細胞でPDE2の遺伝子変異が悪性黒色腫細胞の浸潤能亢進に関与する可能性が示唆されたことより，他の悪性腫瘍細胞で検討したところいくつかの悪性腫瘍細胞でも同様の結果であった．以上より，PDE2の遺伝子変異が悪性黒色腫細胞の浸潤能亢進に関与する可能性が示唆された．
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