2015 Fiscal Year Research-status Report
最終糖化産物とインフラマソームの関連から探る糖尿病関連歯周炎の病態
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15K11391
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| Research Institution | The University of Tokushima |
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Principal Investigator |
板東 美香 徳島大学, 大学病院, 助教 (10510000)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
木戸 淳一 徳島大学, 大学院医歯薬学研究部, 准教授 (10195315)
成石 浩司 徳島大学, 大学病院, 講師 (00346446)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2019-03-31
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| Keywords | 糖尿病関連歯周炎 / 最終糖化産物 / インフラマソーム |
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| Outline of Annual Research Achievements |
インフラマソームはIL-1b、IL-18を産生するために働く細胞質内蛋白質の複合体である。本研究は、最終糖化産物(AGEs)とインフラマソームとの関連からみた糖尿病関連歯周炎の病態解明とインフラマソームを介した炎症増悪化の抑制方法の探索を行うことを目的とした基礎研究である。すなわち歯周組織の細胞において、糖尿病合併症の原因の1つとして知られるAGEsの単独あるいはP-LPSのような歯周病原因子やカルプロテクチンのような炎症起因物質との複合添加により、インフラマソームを誘導し、酸化ストレスやNF-kBの活性化などを介して炎症の増悪化に影響を与える可能性について検証を行う。さらに、インフラマソーム活性化経路を抑制する方法を探索することにより、糖尿病関連歯周炎の病態の解明と新しい治療法の開発をめざしている。平成27・28年度には歯周組織細胞（歯肉上皮細胞、歯肉線維芽細胞）にAGEs単独あるいはP-LPSやカルプロテクチンを複合添加し、インフラマソームの構成因子やIL-1b・IL-18の発現を調べ、糖尿病関連歯周炎とインフラマソームの関連を検証することを目標にしている。さらに、炎症性の増悪化の機序を調べるために、酸化ストレスマーカーやNF-kBの活性化および炎症性サイトカインの産生を測定する予定としていた。これまでに歯肉線維芽細胞においてAGEsおよびP-LPSが酸化ストレス反応を引き起こし、IL-6を増加させることを見出した。しかしながら、歯肉線維芽細胞ではインフラマソーム関連遺伝子の発現が認められなかったため、発現する細胞の探索を行い歯肉上皮細胞、口腔粘膜上皮細胞、単球ではインフラマソームが発現することを確認した。最終糖化産物によるインフラマソームへの影響はどの細胞においても弱かったが、P-LPSにより単球でのインフラマソーム関連遺伝子の発現が著明に増加した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
4: Progress in research has been delayed.
Reason
平成27年度は育児休暇のため実験開始が10月からとなった。
インフラマソーム遺伝子を発現する細胞の探索に時間を要した。
これまで最終糖化産物による影響を調べていた歯肉線維芽細胞では発現が認められなかったため、その他の細胞（歯肉上皮細胞、口腔粘膜上皮細胞、単球、マクロファージ）におけるインフラマソーム遺伝子の発現を調べた。また、最終糖化産物単独での反応性が弱いため、条件検討およびLPSやカルプロテクチンによる複合添加による影響を調べている。
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| Strategy for Future Research Activity |
育児休暇による実験開始・進行状況の遅れから平成30年度まで延長した。
当初の予定では、糖尿病関連歯周炎の局所の病態について検討するために最終産物である最終糖化産物を用いているが、同時に血中の高血糖状態を示す高グルコース状態での影響も調べていく。
今後は最終糖化産物によるインフラマソーム活性について追及していくのと同時に産生されるIL-1bにより誘導されるようなその他の炎症性サイトカイン発現についても調べて行く予定である。またLPSによるインフラマソーム活性が細胞のカリウムイオン流出を促進するATPにより増強するという報告があることから、最終糖化産物との複合作用についても調べる。
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| Causes of Carryover |
育児休暇のため実験開始が10月からとなったため、当初予定よりも実験進行が遅れたことにより、次年度使用額が生じた。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
次年度はマイクロアレイ解析などの受託費が大きいため、次年度使用額と翌年度分と併せて使用する。また、RNA抽出、蛋白実験などの消耗品、使用する細胞が増えたことによる細胞関連の消耗品も増える予定である。
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