2017 Fiscal Year Annual Research Report
Regulatory roles of NRSF/REST variants in the aging brain
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15K14352
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| Research Institution | Nagasaki University |
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Principal Investigator |
森 望 長崎大学, 医歯薬学総合研究科(医学系), 教授 (00130394)
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| Project Period (FY) |
2015-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | 老化 / 老化脳 / 遺伝子発現 / 転写制御 / 細胞培養 / ニューロン / トランスクリプトーム / 放射線障害 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
神経細胞老化に対するNRSFの影響を調べるため、神経系培養細胞Neuro2aにNRSF遺伝子導入したものとしていないものについて、酸化ストレス（H2O2）負荷後の細胞の生存率を比較した。その結果、NRSFを導入した細胞群ではストレス耐性が高いことがわかった。
また、Neuro2a細胞にドキシサイクリン（DOX）でNRSFを誘導できる系を樹立し、この細胞を使って、酸化ストレス（H2O2）と蛋白質凝集ストレス（MG132）の効果を比較検討した。ここでは特にDNA損傷をγ-H2AX fociの数として定量的に比較した。DOXでの誘導細胞と非誘導細胞とで比較すると、DOX誘導24時間によるNRSF発現誘導細胞では、ストレス負荷30分後でDNA損傷の低下がみられ、NRSFによるストレスからの細胞保護作用とDNA損傷応答との関連が示唆された。一方、γ線照射（５Gy）によるDNA損傷誘発時においてはNRSFの有無によるDNA損傷の程度に著しい違いは見られなかった。これらのことからストレスの違いによりDNA損傷に対するNRSFの応答も異なることが示唆された。
さらに神経細胞の老化メカニズムへのNRSF/RESTの関与を探るため、初代培養神経細胞の長期培養法を開発した。マウス胎児の脳海馬からのニューロン、培養1か月の若齢神経細胞と培養4か月の老齢神経細胞のトランスクリプトーム解析をCap analysis of gene expression (CAGE)により比較検討した。多くの遺伝子の発現変動が観察されているが、それらの詳細な分析を現在進めており、NRSF/RESTのターゲント遺伝子群の発現変動パターンの変化を追求しており、今後、老化ニューロンの保護へ向けてのNRSF/RESTの役割の解明への一助となると期待される。
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