Research Abstract |
ハロタンで麻酔したラットを開胸し,クレブス液約50mlを100mmHgの圧をかげながら左心室より潅流後,頚髄を摘出した,次に,ビブラトームを用いて,脊髄の腹側と背側を含むスライス標本(厚さ約150μm)を作成した.この際,脊髄スライス標本は,酸素93%+炭酸ガス7%で通気し,4℃に冷却したクレブス液内で作成した.ついで,この標本を,酸素93%+炭酸ガス7%(われわれのシステムではこの条件下でpH=7.4となる)で通気し,37℃に加温したクレブス液で満たした観察用チャンバーに入れ,約30分間おき,その後,顕微鏡で脊髄内動脈(径5-10μm)を観察した.これら動脈の画像をCCDカメラで撮影し,メディアコンバータを介してコンピュータに取り込んだ.動脈径の変化は,コンピュータ上で,フィジオテック社製(東京)の血管径測定用のソフトウエアを用いて解析した. プロスタグランディンF_<2α>、(0.5μM)を観察用チャンバーの潅流液中に入れ,約15分待って標本中の動脈の収縮反応が安定した後に,潅流液を酸素90%+炭酸ガス10%の混合ガスで通気した,この変更した混合気で通気した状態で20分間標本を観察した.高炭酸ガスにより,脊髄内動脈は拡張反応を示した.これらの高炭酸ガスによる脊髄血管拡張作用が,各種K^+チャネル拮抗薬,一酸化窒素合成酵素阻害薬,可溶性グアニレートシクレース阻害薬,NMDA受容体拮抗薬および各種フリーラジカルスカベンジャー処置で抑制されるか否かを現在検討中である.
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