2005 Fiscal Year Annual Research Report
PDE関連シグナル・遺伝子療法-Melanomaを中心に-
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16390585
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| Research Institution | Mie University |
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Principal Investigator |
田川 俊郎 三重大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (30046346)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
乾 真登可 三重大学, 大学院・医学系研究科, 助教授 (70159961)
村田 琢 三重大学, 医学部附属病院, 助手 (80242965)
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| Keywords | phosphodiesterase / 悪性黒色腫 |
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| Research Abstract |
Phosphodiesterase(PDE)は11種類(PDE1からPDE11)に分類されており,cAMPやcGMPを分解しその濃度を調節している.したがって,cAMPやcGMPによる細胞内シグナル伝達系が存在すれば必ずPDEが存在し,そのシグナルに対して重要な役割を担っている.しかし,悪性腫瘍細胞でのPDEの報告はほとんどなくその役割は全く不明であった.そこで平成16年度基盤研究(B)では悪性黒色腫を中心に悪性腫瘍由来細胞株でPDEを検討し,発現と阻害剤による細胞増殖への影響を確認した.本年度は細胞増殖以外の作用(浸潤)の検討とsiRNAの導入を確認した.
浸潤の検討はPDE3が高発現しているヒト皮膚由来悪性黒色腫細胞株G361とC32を使用した.PDE3特異的阻害剤cilostamideでは浸潤に影響を認めなかった.
siRNAの導入はヒト歯肉由来悪性黒色腫細胞株PMPと腋下リンパ節転移巣由来細胞株MAAを使用した.siRNAを2種類合成後,導入剤を使用して各細胞にsiRNAを導入した.mRNA発現の確認はトータルRNAを抽出,逆転写酵素にてcDNA合成後,リアルタイムPCRにて行った.PMP細胞ではmRNAの発現は約70%,MAA細胞では約90%抑制された.更に,PDE活性を測定したところmRNAの抑制率とほぼ同様であり,siRNAが有効であることを確認した.
平成18年度では,ヌードマウスに腫瘍を移植し検討を行う予定である.
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