2005 Fiscal Year Annual Research Report
ウルトラファインカーボンブラックによる気道上皮細胞のリモデリングとムチン発現
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16590763
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| Research Institution | Tokyo Women's Medical University |
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Principal Investigator |
玉置 淳 東京女子医科大学, 医学部, 教授 (60147395)
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| Keywords | 気道上皮細胞 / リモデリング / 上皮成長因子 / MUC遺伝子 / カーボン微粒子 / 杯細胞 / 粘液分泌 / 喘息 |
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| Research Abstract |
1.MUC遺伝子発現の解析:通常の気道上皮細胞から杯細胞へのtransdifferentiationのメカニズムを明らかにするため,MUC遺伝子(MUC5B, MUC5AC)の発現に対するufCB粒子の影響を検討した.すなわち,16-HBE細胞をufCB粒子に曝露した後,上記遺伝子の発現をRT-PCR, Northern blotを用いて解析し,さらにその作用における細胞内シグナル伝達を明らかにするため,MUC5BおよびMUC5AC発現に対するEGFRチロシンリン酸化阻害薬,HB-EGF阻害薬,MEK阻害薬,核内転写因子(NF-κB)阻害薬,metalloprotease阻害薬,Dominant-negative Ras mutantなどの効果を検討した.その結果,ufCB粒子刺激により,MUC5AC遺伝子の発現のみが亢進し,その効果は上記の阻害薬のいずれによっても抑制された.
2.HB-EGFのprocessingとshedding:16-HBE細胞におけるHB-EGFの動態を検討するため,ufCB粒子で刺激した際のHB-EGF precursor(細胞膜結合型pro-HB-EGF)のprocessingをフローサイトメトリーで解析し,また可溶性HB-EGFの遊離をWestern blotにより検討した.その結果,上記刺激によりpro-HB-EGFは急激に減少し,それに伴いメディウム中への可溶性HB-EGFの遊離の増加が確認された.したがって,ufCB粒子は気道上皮細胞におけるHB-EGFのprocessingを惹起させることが明らかとなった.
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Research Products
(4 results)
