2004 Fiscal Year Annual Research Report
異種細胞および臓器移植におけるマクロファージ性拒絶機構の解明とその制御法の確立
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16591257
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| Research Institution | Hiroshima University |
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Principal Investigator |
大段 秀樹 広島大学, 病院, 助手 (10363061)
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| Keywords | 異種移植 / マクロファージ / 拒絶反応 / CD47 / 遺伝子導入 |
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| Research Abstract |
異種細胞・組織・臓器移植後の免疫応答として、抗体非依存性マクロファージ拒絶機構が存在すること、また、CD47分子(インテグリン関連蛋白質)と阻害受容体シグナル制御蛋白(SIRP)を介したマクロファージの自己認識機構の種特異性を解明した。マクロファージによる異種細胞拒絶機構には貪食とケミカルメディエーターによる直接細胞傷害に分けられる。まず、ヒトマクロファージによるブタ異種細胞貪食試験と傷害性試験を確立した。ヒトマクロファージに強い異種細胞貪食能および傷害性を認めた。標的にしたブタ細胞上のαGal抗原をendo-β-galactosidase Cで処理し除去しても、マクロファージによる被貪食能、被細胞傷害性は影響されなかった。すなわち、ヒトマクロファージによるブタ異種細胞の貪食性、直接細胞傷害性はαGal非依存性であることが解明された。また、マウス-ブタモデルCD47遺伝子導入実験においてCD47自己認識機構の種特異性を証明した。マウスCD47(mCD47)をブタリンパ芽球様細胞株(LCL)遺伝子導入した結果、マウス細胞と同程度ブタ細胞上にmCD47の表出を認めた。LCL-mCD47とLCL-neoをマウスマクロファージと共培養すると、時間依存的にLCL-mCD47の存在比率が増加した。すなわち、ヒト-ブタ間と同様、マウス-ブタ間においてもマクロファージによる抗体補体非依存性の貪食能を認め、ブタ細胞にmCD47を遺伝子導入することによりその貪食を制御し得ることを示した。この結果は、我々の仮説「ヒトマクロファージによるブタ異種細胞の貪食は、ヒトマクロファージのSIRPがブタ細胞上のCD47を認識しないため、非特異的活性化が抑制されず強い貪食を被る」に矛盾しない。以上の結果から、マクロファージ性拒絶反応を制御するには、ヒトCD47トランスジェニックブタの確立が必要である可能性が示唆された。
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