2005 Fiscal Year Annual Research Report
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16606001
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
佐藤 充治 東京大学, 医科学研究所, 助手 (40332621)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
吉田 進昭 東京大学, 医科学研究所, 教授 (10250341)
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| Keywords | ES細胞 / 未分化状態 / Rex-1 / PTB / Rod-1 / ジーンターゲティング |
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| Research Abstract |
マウスES細胞の未分化状態がいかなる細胞内機構によって維持されているのかを解明するため、未分化特異的遺伝子Rex-1の転写調節領域に結合する因子をタンパク精製によって同定した結果、polypyrimidine tract binding-protein(PTB)を得た。この遺伝子をジーンターゲティング法により欠損させたマウスを作製したところ、着床前後で胚性致死となることが判明した。さらにES細胞におけるPTBの重要性について検討するため、PTB遺伝子の両アレルを欠失させたES細胞の作製を行った。その結果、PTB遺伝子欠損ES細胞においては増殖能が著しく低下することが明らかとなり、この表現型はPTB発現ベクターを導入することによって回復することを確認した。胚様体形成による分化誘導実験からは、PTBの欠損がES細胞の分化能にも異常をきたすことが明らかとなった。
PTBの発現がES細胞の増殖・分化能に重要な働きを持つことが示されたが、PTBの発現自体はES細胞を分化させても変化しないことから、何らかの未分化特異的な因子とPTBとの協調作用があることが考えられた。そこで、PTBと相互作用する因子をタンパク精製によって同定したところ、PTBに非常に相同性の高い因子Rod-1が得られた。PTBが機能するためにこの因子が必要であるならば、Rod-1欠損細胞もPTB欠損細胞同様の表現型を示すはずであると考え、Rod-1欠損ES細胞の作製を開始した。
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