Research on the mechanism of hepatocarcinogenesis by long-term replication of hepatitis virus

2018 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 16H05196
• Research Institution: Okayama University
• Principal Investigator: 加藤 宣之 岡山大学, 医歯薬学総合研究科, 教授 (40150883)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 金 惠淑 岡山大学, 医歯薬学総合研究科, 准教授 (70314664) ; 佐藤 伸哉 岡山大学, 医歯薬学総合研究科, 助教 (80333558) ; 團迫 浩方 岡山大学, 医歯薬学総合研究科, 准教授 (80379841) ; 上田 優輝 岡山大学, 医歯薬学総合研究科, 助教 (90756074)
• Project Period (FY): 2016-04-01 – 2019-03-31
• Keywords: C型肝炎ウイルス(HCV) / B型肝炎ウイルス(HBV) / HCV長期複製細胞 / HBV長期複製細胞 / 遺伝子発現変動 / Exosome

Outline of Annual Research Achievements

本研究は、B型肝炎ウイルス(HBV)やC型肝炎ウイルス(HCV)の増殖が長期に及ぶことにより、細胞のがん化を誘導する宿主因子の不可逆的変化が一定の確率で起こるという仮説の立証を目的とした。この目的を達成するために、HCVについては独自に開発したHCVゲノムが自律的に複製増殖する数種類の培養ヒト肝細胞を用いて研究を遂行した。HBVについては、HBVが感染増殖する培養ヒト肝細胞のシステムの構築を行いつつ研究を遂行した。得られた研究成果を以下に示した。
(1) HCVの長期複製により不可逆的に発現低下した遺伝子として同定したCPB2の発現制御候補として絞り込んだ5遺伝子（VCX2, AGR2, ALB, AHSG及びCPB2）について、VCX2とAGR2を培養肝細胞で共発現させた場合にCPB2遺伝子の発現回復が部分的に認められたことから、さらにALB或いはAHSG遺伝子を共発現させ検討したが、更なる発現上昇は認められなかった。(2) ヒト不死化NKNT-3細胞からHBV高感受性として得られたサブクローン化細胞を用いてHBV感染から１ヶ月以上HBVを複製させるシステムを構築した。(3) ヒト肝がんLi23細胞からもHBV高感受性サブクローン化細胞が得られ、HBV感染から3週間以上HBVの複製過程が維持されていることが分かった。(4) (2)と(3)で得られたHBV高感受性細胞を用いた解析から、HBVに対する高感受性化は自然免疫関連因子であるSTINGの発現量が低下することにより引き起こされることを明らかにした。(5) NKNT-3細胞由来のHBV低感受性細胞から産生されるexosome量はHBV高感受性細胞より高いことを明らかにした。さらに、HBV感染により誘導された抗ウイルス活性がexosomeを介して細胞間で伝達されていることを示唆する結果を得た。

Research Progress Status

平成30年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

平成30年度が最終年度であるため、記入しない。

Research Products

• [Journal Article] High‐level expression of STING restricts susceptibility to HBV by mediating type III IFN induction. (2019)
  • Author(s): Dansako H, Imai H, Ueda Y, Satoh S, Shimotohno K, Kato N.
  • Journal Title: FASEB BioAdvances Volume: 1 Pages: 67-80
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Acidic polysaccharides isolated from marine algae inhibit the early step of viral infection. (2019)
  • Author(s): Ueno M, Nogawa M, Siddiqui R, Watashi K, Wakita T, Kato N, Ikeda M, Okimura T, Isaka S, Oda T, Ariumi Y.
  • Journal Title: Int J Biol Macromol Volume: 124 Pages: 282-290
  • DOI: doi: 10.1016/j.ijbiomac
  • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
• [Journal Article] Ribavirin-induced downregulation of CCAAT/enhancer-binding protein α leads to suppression of lipogenesis. (2019)
  • Author(s): Satoh S, Onomura D, Ueda Y, Dansako H, Honda M, Kaneko S, Kato N.
  • Journal Title: Biochem J Volume: 476 Pages: 137-149
  • DOI: doi: 10.1042/BCJ20180680
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Multiple antiviral activities of the antimalarial and anti-hepatitis C drug candidates N-89 and N-251 (2018)
  • Author(s): Ueda Youki、Gu Weilin、Dansako Hiromichi、Kim Hye-Sook、Yoshizaki Sayaka、Okumura Nobuaki、Ishikawa Tomohiro、Nishitsuji Hironori、Kato Fumihiro、Hishiki Takayuki、Satoh Shinya、Ishii Koji、Masuda Michiaki、Shimotohno Kunitada、Ikeda Masanori、Kato Nobuyuki
  • Journal Title: Biochemistry and Biophysics Reports Volume: 15 Pages: 1～6
  • DOI: doi: 10.1016/j.bbrep.2018.05.007
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Daunorubicin, a topoisomerase II poison, suppresses viral production of hepatitis B virus by inducing cGAS-dependent innate immune response. (2018)
  • Author(s): Imai H, Dansako H, Ueda Y, Satoh S, Kato N.
  • Journal Title: Biochem Biophys Res Commun Volume: 504 Pages: 672-678
  • DOI: doi: 10.1016/j.bbrc.2018.08.195.
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Regulation of interferon signaling and HCV-RNA replication by extracellular matrix. (2018)
  • Author(s): Kuwashiro T, Iwane S, Jinghe X, Matsuhashi S, Eguchi Y, Anzai K, Fujimoto K, Mizuta T, Sakamoto N, Ikeda M, Kato N, Ozaki I.
  • Journal Title: Int J Mol Med Volume: 42 Pages: 957-965
  • DOI: doi: 10.3892/ijmm.2018.3693
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Dual effects of the Nrf2 inhibitor for inhibition of hepatitis C virus and hepatic cancer cells. (2018)
  • Author(s): Murakami Y, Sugiyama K, Ebinuma H, Nakamoto N, Ojiro K, Chu P-S, Taniki N, Saito Y, Teratani T, Koda Y, Suzuki T, Saito K, Fukasawa M, Ikeda M, Kato N, Kanai T, Saito H.
  • Journal Title: BMC Cancer Volume: 18 Pages: 680
  • DOI: doi: 10.1186/s12885-018-4588-y
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Presentation] 抗マラリア及び抗HCV薬候補N-89とN-251が有する幅広い抗ウイルス活性 (2018)
  • Author(s): 上田 優輝, 谷イ琳, 團迫 浩方, 金 惠淑, 吉崎 佐矢香, 奥村 暢章, 石川 知弘, 西辻 裕紀, 加藤 文博, 日紫喜 隆行, 佐藤 伸哉, 石井 孝司, 増田 道明, 下遠野 邦忠, 池田 正徳, 加藤 宣之
  • Organizer: 第28回抗ウイルス療法学会学術集会
• [Presentation] Suppression of oncolytic adenovirus-mediated hepatotoxicity by liver-specific inhibition of NF-κB (2018)
  • Author(s): Mitsuhiro Machitani, Fuminori Sakurai, Keisaku Wakabayashi, Masashi Tachibana, Nobuyuki Kato, Toshiyoshi Fujiwara, Hiroyuki Mizuguchi
  • Organizer: 第24回日本遺伝子細胞治療学会学術集会
• [Presentation] B型肝炎ウイルス感染ヒト不死化肝NKNT-3細胞由来のエクソソーム内タンパク質の解析 (2018)
  • Author(s): 團迫 浩方、今井 大誉、上田 優輝、佐藤 伸哉、加藤 宣之
  • Organizer: 第５回日本細胞外小胞学会
• [Presentation] Analysis of the new host factors necessary for susceptibility to HBV using plural human cell lines (2018)
  • Author(s): Youki Ueda, Hiromichi Dansako, Shinya Satoh, Kunitada Shimotohno, Nobuyuki Kato
  • Organizer: 2018 International Meeting on Molecular Biology of Hepatitis B Virus
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Topoisomerase II inhibitor triggers cyclic GMP-AMP synthase-dependent innate immune response in human immortalized hepatocyte NKNT-3 (2018)
  • Author(s): Hirotaka Imai, Hiromichi Dansako, Youki Ueda, Shinya Satoh, Nobuyuki Kato
  • Organizer: 第66回日本ウイルス学会
• [Presentation] Drug screening for suppression of lipogenesis through downregulation of C/EBPα (2018)
  • Author(s): Shinya Satoh, Daichi Onomura, Koichi Watashi, Youki Ueda, Hiromichi Dansako, Masao Honda,, Shuichi Kaneko, Nobuyuki Kato
  • Organizer: 第66回日本ウイルス学会
• [Presentation] Mechanism of GPAM suppression by Anti-HCV drug ribavirin (2018)
  • Author(s): Daichi Onomura, Shinya Satoh, Youki Ueda, Hiromichi Dansako, Nobuyuki Kato
  • Organizer: 第66回日本ウイルス学会
• [Presentation] Screening of the new host factors necessary for HBV proliferation using plural human cell lines (2018)
  • Author(s): Youki Ueda, Hiromichi Dansako, Shinya Satoh, Kunitada Shimotohno, Nobuyuki Kato
  • Organizer: 第66回日本ウイルス学会
• [Presentation] Analysis of host and viral factors contributing to resistant acquisition for the preclinical anti-HCV drugs, N-89 and N-251 (2018)
  • Author(s): Weilin Gu, Youki Ueda, Shinya Satoh, Hiromichi Dansako, Nobuyuki Kato
  • Organizer: 第66回日本ウイルス学会
• [Presentation] Highly expression of STING restricts HBV infection by mediating the induction of type III interferon in human immortalized hepatocyte NKNT-3 (2018)
  • Author(s): Hiromichi Dansako, Hirotaka Imai, Youki Ueda, Shinya Satoh, Kunitada Shimotohno, Nobuyuki Kato
  • Organizer: 第66回日本ウイルス学会
• [Presentation] Perospirone, an antipsychotics, exhibits anti-hepatitis C virus activity (2018)
  • Author(s): Midori Takeda, Tomoka Taniguchi, Matsue Maezono, Takaji Wakita, Nobuyuki Kato, Masanori Ikeda
  • Organizer: 第66回日本ウイルス学会
• [Presentation] 抗HCV剤としての抗精神病薬ペロスピロンの可能性について (2018)
  • Author(s): 武田 緑、谷口 智香、前園 夏絵、脇田 隆字、加藤 宣之、池田 正徳
  • Organizer: 第41回日本分子生物学会年会
• [Remarks] 腫瘍ウイルス学分野Research
  • URL: http://www.okayama-u.ac.jp/user/med/dmb/research.html