子宮粘膜を刺激するインターフェロンを用いた経膣免疫法の研究

2017 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 16K08044
• Research Institution: Iwate University
• Principal Investigator: 彦野 弘一 岩手大学, 農学部, 准教授 (60355146)
• Project Period (FY): 2016-04-01 – 2019-03-31
• Keywords: ワクチン / ウイルス / アジュバント / 感染防御 / 胎盤 / 子宮

Outline of Annual Research Achievements

本研究の目的は、経胎盤感染を阻止できる粘膜免疫応答の特徴を明らかにすることである。そのために、マウスおよびウサギにおける牛ウイルス性下痢（Bovine Viral Diarrhea：BVD）ウイルスの感染をモデルとして、BVDウイルスワクチンおよびインターフェロンタウ（IFN-t）を経膣（子宮内）投与し、子宮粘膜に誘導される免疫応答を解析する。さらに上記ワクチンにて免疫した妊娠動物をBVDVウイルスにて攻撃し、防御効果（経胎盤感染の阻止）を検証する。
今年度は、遺伝子組換えBVDウイルス抗原蛋白質の発現がうまくいかなかった。そのため、BVDウイルス特異的抗体や、BVDウイルス特異的なリンパ球を定量するための測定系を組み立てることができなかった。現在、遺伝子組換えBVDウイルス抗原蛋白質ではなく、BVDウイルス全粒子を抗原とする測定系の構築を進めている。
今年度は、マウスに不活化BVDウイルスおよびIFN-tを異なる経路から免疫した。8週齢の雌マウス（BALB/c）30匹を6群に分けた：①IFN-t添加不活化BVDウイルス/経膣投与、②不活化BVDウイルス/経膣投与、③IFN-t添加不活化BVDウイルス/筋肉内投与、④不活化BVDウイルス/筋肉内投与、⑤IFN-t添加不活化BVDウイルス/腹腔内投与、⑥不活化BVDウイルス/腹腔内投与。3週間隔で2回免疫した。2週間後に血清と子宮を採材した。

Current Status of Research Progress

4: Progress in research has been delayed.

Reason

遺伝子組換えBVDウイルス抗原蛋白質の発現がうまくいかなかった。そのため、BVDウイルス特異的抗体や、BVDウイルス特異的なリンパ球を定量するための測定系を組み立てることができなかった。現在、遺伝子組換えBVDウイルス抗原蛋白質ではなく、BVDウイルス全粒子を抗原とする測定系の構築を進めている。

Strategy for Future Research Activity

今後は、BVDウイルス全粒子を抗原とする測定系を確立する。その後、免疫マウスから採材した血清と子宮に含まれるBVDウイルス特異的抗体をELISAにて定量し、液性免疫を評価する。また、脾臓と子宮から単核球を分離し、BVDウイルスの刺激により産生されるIFN-gをELISAにて定量し、細胞性免疫を評価する。

Causes of Carryover

（理由）交付された直接経費を適正に使用したが、端数が出たため。
（使用計画）物品費として使用する予定である。