2017 Fiscal Year Research-status Report
アセトアルデヒド代謝機能改善に基づく食道発がん予防法の開発
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16K09281
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| Research Institution | Kyoto University |
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Principal Investigator |
大橋 真也 京都大学, 医学研究科, 助教 (20435556)
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2016-04-01 – 2019-03-31
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| Keywords | ヒト変異型ALDH2ノックインマウス / Alda-1 / ALDH2活性 / DNAアダクト |
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| Outline of Annual Research Achievements |
申請書の計画通り、内因性のマウスAldh2遺伝子をヒトALDH2野生型遺伝子(ALDH2*1)またはヒトALDH2変異型遺伝子(ALDH2*2)に置換した遺伝子組み換えマウス（ALDH2*1またはALDH2*2ノックインマウス）を作成した。マウス作成時に同時に組み込まれた薬剤耐性遺伝子はCAG-Creマウスとの掛け合わせにより除去した。こうして完成したALDH2*1またはALDH2*2ノックインマウスを、それぞれ掛け合わせ、ALDH2*1/*1マウス、ALDH2*1/*2マウス、ALDH2*2/*2マウスの3群のマウスを作成した。これらのマウス群の肝ALDH2活性を測定したところ、ALDH2*1/*1>ALDH2*1/*2>ALDH2*2/*2となり、合理的なデータが得られた。これらのマウスに10%エタノールを7日間自由摂取させた後、食道組織を採取し、DNAを抽出してLC/MS/MS法にてDNAアダクト(N2-ethylidene-dG)値を測定したところ、ALDH2*1/*1＜ALDH2*1/*2, ALDH2*2/*2となった。さらに、ALDH2*1/*1マウス、ALDH2*1/*2マウス、ALDH2*2/*2マウスの3群のマウスにAlda-1を20mg/kg body weight)で腹腔内投与し、3時間後に肝ALDH2を測定したところ、ALDH2*1/*2マウス、ALDH2*2/*2マウスのALDH2活性はALDH2*1/*1マウスと同等にまで回復していた。現在、ALDH2*1/*1マウス、ALDH2*1/*2マウス、ALDH2*2/*2マウスの3群に10%エタノールを7日間自由摂取の上、Alda-1治療を行い、食道組織中DNAアダクトレベルを検討中である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
計画書に記載した内容に従い、マウスモデルを完成させ、遺伝子変異している個体における飲酒の影響、食道DNA傷害について概ね順調な結果が出ており、また、ALDH2活性増強剤についても良好なALDH2活性増強効果を確認できている。
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| Strategy for Future Research Activity |
今後は、計画書に記載の通り、変異型ALDH2ノックインマウスおよびそのコントロールマウスに飲酒、およびAlda-1の投与を行い、食道に生じるDNA傷害の改善効果をN2-ethylidene-dG値測定による定量と、γーH2AXの免疫染色により検討する。また、Alda-1と逆の効果を持つ、ALDH2抑制剤のcyanamideを用いて、ALDH2抑制によるDNA傷害の増強効果についても検討を行う予定である。
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[Journal Article] Distinct effects of EGFR inhibitors on epithelial- and mesenchymal-like esophageal squamous cell carcinoma cells.2017
Author(s)
Yoshioka M, Ohashi S, Ida T, Nakai Y, Kikuchi O, Amanuma Y, Matsubara J, Yamada A, Miyamoto S, Natsuizaka M, Nakagawa H, Chiba T, Seno H, Muto M.
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Journal Title
J Exp Clin Cancer Res.
Volume: 36
Pages: 101
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Establishment of a quick and highly available accurate breath test for ALDH2 genotyping.2017
Author(s)
Aoyama I, Ohashi S, Amanuma Y, Hirohashi K, Mizumoto A, Funakoshi M, Tsurumaki M, Nakai Y, Tanaka K, Hanada M, Uesaka A, Chiba T, Muto M.
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Journal Title
Clin Transl Gastroenterol.
Volume: 8
Pages: e96
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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