2019 Fiscal Year Annual Research Report
Identification of sentization markers and elucidation of drug resistance mechanism for FGFR inhibitors on cholangiocarcinoma
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16K09400
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| Research Institution | Nagoya City University |
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Principal Investigator |
宮部 勝之 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(医学), 研究員 (00543985)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
林 香月 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(医学), 准教授 (00405200)
内藤 格 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(医学), 講師 (30527750)
吉田 道弘 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(医学), 助教 (20636328)
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | FGFR阻害剤 / 胆管癌 / 薬剤抵抗性 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
我々はFGFR 阻害剤の薬剤抵抗性獲得に寄与する機序を解明し、腫瘍発生・進展メカニズムへの影響を検討することとした。最終的には本機序の臨床的意義解明を目的とした。
in-vitro実験として、FGFR2-CCDC6 癒合遺伝子を持つ肝内胆管癌primary cell であるLIV31は増殖が極めて緩徐であるため、代わりにFGFR増幅を持つ肝内胆管細胞株KMBCを使用した。これを用いてPonatinib投与濃度を徐々に上げて薬剤耐性株を作成し、現在解析を進めているところである。
また、in-vivo実験として、Mayo Clinicにてあらかじめ作成されたFGFR阻害剤投与したのpatient-derived xenograft (PDX)とコントロールとしてvehicleのみ投与されたPDXよりDNAを抽出し、FGFR family geneを中心として遺伝子変異を調べるgene panel analysisを実施した結果によると、薬剤投与PDX群では、コントロール群では検出されなかった遺伝子の変異が検出された。さらにこれらの検体を用いてCopy Number Variation (CNV) analysisを行うと、FGFR阻害剤の一つBGJ398投与群では明らかな異常を認めなかったが、別のFGFR阻害剤であるPonatinibを投与したxenograftにおいてはコントロールと比較し、SLIT2 の欠失、TBC1D15の増幅など、複数の遺伝子異常が認められた。
次に、Ponatinibを米国の臨床研究にて投与された患者検体が存在したため、この検体との比較を行ったところ、8個の遺伝子の欠失、14個の遺伝子の増幅が共通していた。現在、これらの遺伝子のpathwayでの関連を調べるべく、さらなるExome sequenceを同一検体にて施行しているところである。
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