Analysis for melanocyte-specific T cells anargy system in autoimmune vitiligo

2019 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 16K10154
• Research Institution: Osaka University
• Principal Investigator: 種村 篤 大阪大学, 医学系研究科, 講師 (50457016)
• Project Period (FY): 2016-04-01 – 2020-03-31
• Keywords: 白斑 / メラノサイト / 自己免疫

Outline of Annual Research Achievements

・汎発型尋常性白斑症例より末梢血を採取し、メラノサイト抗原の一つであるMelanAに対する特異的CD8 T細胞を分離する技術を習熟した。
・分離したMelanA特異的CD8 T細胞での免疫チェックポイント分子（PD-1, CTLA-4, LAG-3など）およびCCR7/CD45RO発現を解析し、白斑症例の末梢血でメラノサイトに対する障害性細胞の活性化状態が更新していることを明らかにした。また、アナジーに陥ったCCR7+C TLA-A+ MelanA特異的T細胞が白斑症例の末梢血で減少しており、T細胞免疫アナジーが破綻していることが示唆された。
・同時にCD4+CD25+制御性T細胞も同時に単離後、これらをin vitro共培養するシステムを構築し、健常者に比べCD8 T細胞の増殖抑制効果が低下していることを明らかにした。つまり、機能的にも抗原特異的T細胞免疫の抑制出来ないことを実証した。
・さらに末梢血解析の一環として、健常人（n=7）と進行性白斑症例（n=7）の末梢血を採取しCyTOF法を用いて網羅的にリンパ球プロファイルの差異を調べた。その結果、エフェクター・メモリー・ナイーブT細胞、制御性T細胞など多岐に渡るリンパ球数に有意な差がみられなかった。このことより、白斑皮膚に局在するリンパ球での病的意義を探る必要性が示唆された。
・次に、生細胞として皮膚局在T細胞（レジデントT細胞）に注目し、最近自己免疫性白斑に機能しているといわれるCD49a+CD103+CD8 T細胞の単離を試み、現在5x103細胞の単離に成功している