オルファン型核内レセプターNR4A1に対する新規リガンドの膀胱癌治療への応用

2017 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 16K11009
• Research Institution: Kagawa University
• Principal Investigator: 田岡 利宜也 香川大学, 医学部, 助教 (10403784)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 筧 善行 香川大学, 医学部, 教授 (20214273) ; 杉元 幹史 香川大学, 医学部附属病院, 准教授 (10243768)
• Project Period (FY): 2016-04-01 – 2019-03-31
• Keywords: Specificity Protein / ROS / CF3DODA-Me / Stem cells

Outline of Annual Research Achievements

本研究はオルファン型核内レセプターNR4A1の新規リガンドであるC-DIMsの膀胱癌治療への応用を目指して計画された。しかしながら、C-DIMsの十分な供給が得られない状況が続いており、C-DIMSを用いた研究は進行していない。そのため我々は、C-DIMsと同じくSp(Specificity Protein)抑制を介して抗腫瘍効果を発揮する可能性を有する、甘草由来の新規化合物であるCF3DODA-Me(Methyl 2-trifluoromethyl-3, 11-dioxo-18β-olean-1, 12-dien-30-oate)の研究を遂行している。
昨年度までに我々は、CF3DODA-Meが3種類の膀胱癌細胞において、それら癌細胞の増殖を抑制し、そしてアポトーシスを誘導することを確認した。さらにCF3DODA-MeがROS(Reactive Oxygen Species)の産生を誘導し、それに続くSp、およびSp-regulated proteinsの発現抑制を介して、最終的に抗腫瘍効果を発揮するメカニズムを証明した。
今年度我々は、CF3DODA-Meの抗腫瘍効果が最も高かったRT4膀胱癌細胞株を対象とし、まずCDDP処理にて膀胱癌幹細胞を樹立した。その癌幹細胞において、CF3DODA-MeはSp、およびSp-regulated proteinの発現を低下させ、sphere formationを阻害したほか、colony formationも有意に抑制した。さらに我々は、RT4v6膀胱癌細胞株を用いたヌードマウス皮下腫瘍モデルを作製し、CF3DODA-Meが腫瘍成長を有意に抑制することを確認した。現在、腫瘍組織を用いた免疫組織染色、さらには蛋白の発現解析を予定しており、その後の論文化を目指す。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

これまでの我々の研究は、CF3DODA-Meによって増加した細胞内のROSが、SpおよびSp-regulated proteinの発現抑制に繋がり、最終的に抗腫瘍効果を示す可能性を初めて裏付けるもので、残る追加実験を経て論文化を目指している。

Strategy for Future Research Activity

我々は、C-DIMsの供給を受けることが出来ず、そのため同様の薬理作用を発揮すると考えられる新規化合物CF3DODA-Meを用いた研究を開始した。その研究成果は順調に蓄積されており、in-vivo実験で得らた組織を解析後に、それら成果をまとめた論文の公表を目指している。

Causes of Carryover

本研究は順調に推移しているほか、実験室で既に整備されている機材を用いて遂行しているため、実際の実験経費は予定していた経費よりものよりも少なかった。