Annexin A4 is a novel therapeutic target for uterine leiomyosarcoma.

2018 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 16K11137
• Research Institution: Osaka University
• Principal Investigator: 藤田 征巳 大阪大学, 医学系研究科, 招へい准教授 (60303963)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 松崎 慎哉 大阪大学, 医学部附属病院, 助教 (00467565) ; 上田 豊 大阪大学, 医学系研究科, 講師 (10346215) ; 高田 友美 大阪大学, 医学系研究科, 助教 (30437420) [Withdrawn] ; 小林 栄仁 大阪大学, 医学系研究科, 助教 (50614773) ; 吉野 潔 産業医科大学, 医学部, 教授 (90362730)
• Project Period (FY): 2016-04-01 – 2019-03-31
• Keywords: Annexin A4 / プラチナトランスポーター / 子宮平滑筋肉腫 / 抗癌剤耐性 / 中和抗体

Outline of Annual Research Achievements

① 子宮平滑筋肉腫細胞に特異的に発現する膜蛋白質の解析
子宮平滑筋肉腫(LMS)の予後が不良な要因の一つとして、プラチナ製剤が無効であることがわかっている。LMSにおいてどの様なプラチナ排出トランスポーターが発現しているかを解析するために、LMS細胞株であるSK-LMS、SK-UT1、SKN細胞株を用いiTRAQ法にて細胞膜表面に発現する蛋白質を網羅的に解析した。その際に、複数個のプラチナトランスポーターを同定するとともに副次的に、子宮平滑筋肉腫細胞に特異的に発現するCD70を同定した。
② CD70の発現抑制は子宮平滑筋肉腫細胞株の増殖を抑制した
iTRAQ法にて同定されたCD70が実際にLMS細胞において発現するかをWestern Blotting法を用い検討したところSK-LMS、SKN細胞株で発現を認めた。SK-LMS細胞株に対しCD70のsiRNAを遺伝子導入し発現を抑制したところ、7日目の解析において72%の増殖抑制を認めた。そのため、CD70がLMS細胞株の増殖において重要な役割を有していることが示された。
③ CD70の中和抗体は子宮平滑筋肉腫細胞株の増殖を抑制した
CD70の中和抗体を、SK-LMS細胞株に投与したところ7日目において、28%の増殖抑制が認められた。そのため、CD70に対する中和抗体はLMSの治療標的になると考えられた。CD70の発現の抑制や、中和抗体の投与がどの様な機序でSK-LMS細胞株の増殖を抑制したかを解析するために、MAPK、PI3K、mTORシグナルを初めとした様々なシグナル解析を行ったが、siRNAの遺伝子導入前後やCD70中和抗体の投与前後において変化を認めなかった。引き続き、どの様な機序で増殖が抑制されたかを検討していく予定とした。