虚血耐性現象における傷害誘導性神経幹細胞の解析

2016 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 16K11774
• Research Institution: Osaka Dental University
• Principal Investigator: 百田 義弘 大阪歯科大学, 歯学部, 教授 (60247880)
• Project Period (FY): 2016-04-01 – 2019-03-31
• Keywords: 虚血耐性 / 神経幹細胞 / 神経保護作用

Outline of Annual Research Achievements

ＣＢ１７系統マウス一過性局所脳虚血モデルを用いて虚血耐性獲得の有無を検討している。１０分間の一過性虚血負荷後に、１０分間の再灌流を３回行った後に、４０分間の致死的虚血負荷を加える。
また、５分間の一過性虚血負荷後に、１０分間の再灌流を３回行った後に、４０分間の致死的虚血負荷を加える。４０分間の致死的虚血負荷を加えた場合と１０分間および５分間の非致死的虚血負荷を予め加えた場合の虚血耐性能獲得の差異を再灌流３日後にTTC染色にて比較検討をしている。
５分間、１０分間の非致死的一過性虚血負荷により致死的虚血負荷後に軽度の梗塞巣の縮小効果が確認されたが、５分間と１０分間の非致死的虚血後の耐性能の相違については、明らかな差がみられなかった。免疫組織化学染色により、予め非致死的な一過性虚血負荷を加えることにより梗塞巣内においてもnestin陽性神経幹細胞の発現を認めた。nestin陽性神経幹細胞が反応性アストロサイトであるか、ペリサイト由来であるかを今後は検討する予定である。
さらに、非致死的虚血負荷により神経幹細胞発現量が増加するかどうかは今後さらに検討し、予め非致死的虚血負荷を加えることによる致死的負荷後の神経幹細胞の発現動態を観察するとともに、脳保護作用の観点からカスパーゼの発現についても検討を加える必要がある。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

実験動物の確保がやや困難な状況であり、当初の計画を遂行できていない。
また、TTC染色後の画像解析ソフトの不具合もあり、再検討する予定である。

Strategy for Future Research Activity

５分間および１０分間の非致死的虚血負荷を加えることによる梗塞巣の比較を詳細に検討し、今後は免疫組織染色により神経幹細胞発現の相違を検討する予定である。同時に、神経保護の観点からアポトーシスの有無についても評価する。

Causes of Carryover

研究に必要な機器備品の確保ができなかった。

Expenditure Plan for Carryover Budget

高性能な機器備品を計画的に購入する予定である。