2005 Fiscal Year Annual Research Report
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17046017
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| Research Institution | Nagoya City University |
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Principal Investigator |
加藤 晃一 名古屋市立大学, 大学院薬学研究科, 教授 (20211849)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
山口 芳樹 名古屋市立大学, 大学院薬学研究科, 講師 (90323451)
栗本 英治 名古屋市立大学, 大学院薬学研究科, 助手 (90234575)
高橋 禮子 名古屋市立大学, 大学院薬学研究科, 客員教授 (90079989)
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| Keywords | 生体生命情報学 / 分子認識 / 生体分子 / 糖鎖 / 薬学 |
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| Research Abstract |
免疫グロブリンGのFc領域(IgG-Fc)に結合している糖鎖はエフェクター活性の発現に必須であることが知られている。均一に安定同位体(^<13>C/^<15>N)標識を施したIgG-Fcを対象として、超高磁場NMR装置を用いたIgG-Fcの計測を試みた。その結果、IgG-Fcの良質な高分解能NMRスペクトルを得ることに成功し、糖鎖およびポリペプチド鎖の高次構造と運動性に関する情報を原子レベルで明らかにすることができた。また高マンノース型糖鎖の920MHzにおけるNMR計測を行ったところ、すべてのアノメリックシグナルを分離して観測することができた。その高い分解能を生かして、積み荷糖タンパク質の輸送を担っているVIP36の糖鎖結合特異性を調査した。その結果、VIP36は高マンノース型糖鎖のうち、特にD1アームのトリマンノース部分を認識することが示された。VIP36の糖鎖結合特異性とその細胞内局在を考慮すると、VIP36はシスゴルジネットワークにおいてD1アームを保持している糖タンパク質を積み荷として捕まえて、それらを小胞体へと逆行輸送することにより品質管理に寄与していることが示唆された。また、本研究を進める上で、多次元HPLCマップ法を基盤とした糖鎖ライブラリー(様々な糖鎖構造をもつ糖鎖標準品のセット)を構築することができた。特に硫酸化糖鎖やグルクロン酸含有糖鎖など、天然には僅かしか存在しない糖鎖のライブラリーの構築に成功した。これらの糖鎖はレクチンの糖鎖結合特異性を明らかにすることや、糖鎖結合タンパク質の探索などにおいて威力を発揮することが期待される。
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