2005 Fiscal Year Annual Research Report
SAGE法で抽出した新規胃がん特異遺伝子の機能解析と診断・治療への展開
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17390104
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| Research Institution | Hiroshima University |
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Principal Investigator |
安井 弥 広島大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 教授 (40191118)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
中山 宏文 広島大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 助教授 (50253068)
大上 直秀 広島大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 助手 (60346484)
倉岡 和矢 広島大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 助手 (00397928)
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| Keywords | 胃癌 / SAGEライブラリー / 治療標的 / ELISA / REGIV / MIA / MMP-10 / 三次元カスタムアレイ |
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| Research Abstract |
胃癌と正常臓器のSAGEライブラリーの比較から新しい特異的発現遺伝子を抽出し、標的治療・予防を視野に入れた診断系の確立を目的として、本年度は以下のとおり研究を実施した。
1)胃癌と正常臓器のSAGEライブラリー比較による新規癌特異的遺伝子候補の抽出:我々の胃癌SAGEライブFeb;26ラリー(GEO accession no.GSE545)と正常14臓器のライブラリーとの比較および定量的RT-PCR法により、胃癌特異的発現遺伝子としてAPIN, TRAG3,CYP2W1,MIA,MMP-10,DKK4,GW112,REGIV,HORMAD1を同定した。
2)Recombinant蛋白の調整およびモノクローナル抗体の作成:上記9遺伝子の内、抗体の得られていないものについて、順次Recombinant蛋白を精製し、常法に従いモノクローナル抗体の作成を行っている。得られた各クローンについて、液相系、ウエスタンブロット、免疫染色にて反応性、特異性を確認している。
3)免疫組織化学による蛋白の局在と臨床病理学的事項との関連解析:抗体が入手可能なMIA,DKK4,MMP-10および独自に抗体を作成したREGIVでは、免疫染色において発現を検討し、MIAとMMP-10では発現と悪性度、予後との相関が見い出された。REGIVでは、胃癌の他に、大腸癌、膵癌、消化管カルチノイドが陽性であった。
4)ELISA系を用いた血中レベルの測定:MIA,MMP-10,REGIVについては、ELISAにより血清レベルを測定し、胃癌患者中REGIVでは36%、MMP-10では95%が高値を示した。
5)SAGEライブラリーに基づいた胃癌組織解析用カスタムアレイによる解析:上記で抽出した癌特異的発現遺伝子を含む207遺伝子を搭載する三次元カスタムアレイを新たに作成し、約20症例の胃癌を解析し臨床病理学的事項との検討を行った。
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Research Products
(13 results)
