2005 Fiscal Year Annual Research Report
化学物質によりDNAメチレーション変化が誘発されるメカニズムの解明
Project/Area Number |
17510041
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Research Institution | Chiba University |
Principal Investigator |
深田 秀樹 千葉大学, 大学院・医学研究院, 特任助教授 (00359598)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
森 千里 千葉大学, 大学院・医学研究院, 教授 (90174375)
小宮山 政敏 千葉大学, 環境健康都市園芸フィールド科学教育研究センター, 講師 (70175339)
松野 義晴 千葉大学, 大学院医学研究院, 助手 (00376378)
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Keywords | マウス / DNAメチレーション / RLGS / MCA-RDA |
Research Abstract |
DNAメチレーション変化の基礎的データを得る目的で、C57BL/6系マウス新生仔に生後1日目から5日目まで3μg/mouse/dayのスケジュールでdiethylstilbestrol(DES)を投与し、5日齢、14日齢、30日齢での子宮におけるDNAメチル化酵素(Dmnt1,Dmnt3a,Dmnt3b)の発現を調べた。その結果、DESを登用したマウスでは5日齢、14日齢でこれら酵素のmRNA量が減少し、30日齢では両者に差は見られなくなった。これと並行して、DES投与した30日令マウスとしなかった30日令マウスから精巣上体を採取し、Restriction Landmark Genomics Scanning(RLGS)法で同定したDNAメチル化が異なる子宮遺伝子について、メチル化部位(NotI部位)をはさんだPCR法を用いてゲノムDNAのメチル化を定量したところ、DES投与で有意にDNAメチル化の程度が低下していた。RLGS法とは別にmethylated CpG island amplification-representational difference analysis(MCA-RDA)でDNAメチル化が変化している遺伝子のクローニングを進めているが、まだ両者で違いのある遺伝子の同定には至っていない。また、次年度への準備として精巣状態由来クロマチンをクロマチン免疫沈降法(ChIP)を適用するための条件検討を行った。
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Research Products
(4 results)
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[Journal Article] Fetal exposure to phytoestrogens - the difference of phytoestrogen status in mother and fetus.2005
Author(s)
Todaka, E., Sakurai, K., Fukata, H., Miyagawa, H., Uzuki, M., Omori, M., Osada, H., Ikezuki, Y., Tsutsumi, O., Iguchi, T., Mori, C.
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Journal Title
Environ.Res. 99(2)
Pages: 195-203
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[Journal Article] Association of increased type I collagen expression and relative stromal overgrowth in mouse epididymis neonatally exposed to diethylstilbestrol.2005
Author(s)
Yamazaki, K., Fukata, H., Adachi, T., Tainaka, H., Kohda, M., Yamazaki, M., Kojima, K., Chiba, K., Mori, C., Komiyama, M.
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Journal Title
Mol.Reprod.Dev. 72(3)
Pages: 291-298
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