インフルエンザ菌の人気道上皮細胞におけるバイオフィルム産生に関する研究

2005 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 17591049
• Research Institution: Nagasaki University
• Principal Investigator: 渡邊 浩 長崎大学, 医学部・歯学部附属病院, 講師 (90295080)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 大石 和徳 大阪大学, 微生物病研究所, 特任教授 (80160414) ; 渡邊 貴和雄 長崎大学, 熱帯医学研究所, 助手 (20220874)
• Keywords: Haemophilus influenzae / バイオフィルム / Nontypeable H. influenzae / H. influenzae type b / BLNAR

Research Abstract

Nontypeable Haemophilus influenzae(NTHi)は中耳炎、気管支炎や肺炎など様々な感染症を人に引き起こす菌であり、一方H.influenzae type b(Hib)は小児の髄膜炎の起炎菌として重要である。近年、NTHiがバイオフィルムを産生することが報告されているが、今回我々はNTHiとHibのバイオフィルム産生能の違いを明らかにする目的で以下の検討を行った。血清型判定によりb型と判定された25株のHib(上気道由来4株、髄液由来21株)、血清型判定およびPCRによる耐性遺伝子検索を行った上で判定された22株のβ-lactamase-negative ampicillin(ABPC)-resistant(BLNAR)NTHi(上気道由来16株・眼脂由来3株、中耳由来3株)、26株のβ-lactamase-negative ABPC-susceptible(BLNAS)NTHi(上気道由来13株、喀痰由来13株)、28株のTEM-1型β-lactamase-producing ABPC-resistant(BLPAR)NTHi(上気道由来16株、喀痰由来12株)を対象としてマイクロプレートを用い、24時間後のbiofilm growth assayを行った。このうちバイオフィルム産生株、非産生株の間で走査型電子顕微鏡を用いて経時的なバイオフィルム産生の画像的変化を比較検討した。Hib,BLNAR-NTHi,BLNAS-NTHi,BLPAR-NTHiのbiofilm growth assayにおけるOD_<600>の平均値はそれぞれ0.09(range:0-0.86),0.50(range:0.13-1.19),0.57(range:0.01-1.48),0.34(0.01-0.96)であった。走査型電子顕微鏡による観察ではBLNAR-NTHi,BLNAS-NTHi,BLPAR-NTHi間のバイオフィルム形成はほぼ同様であったが、Hibでは数株を除いて菌の表面への付着が乏しく、バイオフィルム形成もほとんどみられなかった。バイオフィルム形成がみられたHibの多くは、PCR,sequenceにより莢膜が脱落していることが確認された。その確認のため現在米国アイオワ大学微生物学教室と共同で莢膜を脱落させた作成に取り組んでおり、今後Hibにおける莢膜とバイオフィルム形成の関連について明らかにしていく予定である。

Research Products

• [Journal Article] Significant reduction of nosocomial pneumonia after introduction of disinfection of upper airways using povidone-iodine in geriatric wards. (2006)
  • Author(s): Masaki H, Nagatake T, Asoh N, Yoshimine H, Watanabe K, Watanabe H, Oishi K, Rikitomi N, Matsumoto K.
  • Journal Title: Dermatology 212,suppl1 Pages: 92-96
• [Journal Article] Role of sialic acid and complex carbohydrate biosynthesis in biofilm formation by nontypeable Haemophilus influenzae in the chinchilla middle ear. (2005)
  • Author(s): Jurcisek J, Greiner L, Watanabe H, Zaleski A, Apicella MA, Bakaletz LO.
  • Journal Title: Infection and Immunity 73 Pages: 3210-3218
• [Journal Article] Molecular analysis of intrafamiliar transmission in Moraxella catarrhalis. (2005)
  • Author(s): Watanabe H, Hoshino K, Sugita R, Asoh N, Guio H, Qin L, Kaji C, Watanabe K, Oishi K, Nagatake T.
  • Journal Title: International Journal of Medical Microbiology 295 Pages: 187-191
• [Journal Article] A comparative molecular analysis of Haemophilus influenzae isolates from young children with acute lower respiratory tract infections and meningitis in Hanoi, Vietnam. (2005)
  • Author(s): Watanabe H, Kaji C, Anh DD, Huong Ple T, Anh NT, Huong VT, Phuong HV, Thi NT, Suu PT, Nguyet NT, Rusizoka OS, Watanabe K, Nagatake T, Oishi K.
  • Journal Title: Journal of Clinical Microbiology 43 Pages: 2474-2476
• [Journal Article] Molecular characterization of the transmission between the colonization of methicillin-resistant Staphylococcus aureus to human and environmental contamination in geriatric long-term care wards. (2005)
  • Author(s): Asoh N, Masaki H, Watanabe H, Watanabe K, Mitsusima H, Matsumoto K, Oishi K, Nagatake T.
  • Journal Title: Internal Medicine 44 Pages: 41-45
• [Book] 化学療法の領域 (2005)
  • Author(s): 加地千春, 渡辺 浩。
  • Total Pages: 69-71
  • Publisher: Haemophilus influenzaeとバイオフィルム産生〜感染症難治化とバイオフィルム疾患の解明を目指して〜。