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2018 Fiscal Year Annual Research Report

緑色蛍光タンパク質の超精密構造解析

Research Project

Project/Area Number 17H03643
Research InstitutionKyoto University

Principal Investigator

竹田 一旗  京都大学, 理学研究科, 准教授 (30332290)

Project Period (FY) 2017-04-01 – 2020-03-31
Keywordsタンパク質 / 蛍光
Outline of Annual Research Achievements

昨年度の予備実験で光励起状態の割合が想定以上に小さいことが判明していたため、より反応中間状態の割合が高くなると想定される2種類の変異体型GFP(T203I/E222QおよびT203V/E222Q)を作製し、精製条件を確立した。精製した標品を用いて、吸収および蛍光スペクトルを測定し、それらのpH依存性も確認した。その結果、反応中間状態の割合がpHに依存して変化することが判明し、蓄積に最適なpHを決定することができた。また、T203V/E222Q変異体の発現量が大きく、結晶化実験に適していることが判明した。このため、この変異体を使用して実験を進めたが、水素原子位置の決定が可能な高分解能回折データを収集するには至らなかった。

Research Progress Status

翌年度、交付申請を辞退するため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

翌年度、交付申請を辞退するため、記入しない。

  • Research Products

    (1 results)

All 2019

All Journal Article (1 results) (of which Peer Reviewed: 1 results,  Open Access: 1 results)

  • [Journal Article] Subatomic resolution X-ray structures of green fluorescent protein2019

    • Author(s)
      Takaba Kiyofumi、Tai Yang、Eki Haruhiko、Dao Hoang-Anh、Hanazono Yuya、Hasegawa Kazuya、Miki Kunio、Takeda Kazuki
    • Journal Title

      IUCrJ

      Volume: 6 Pages: 387~400

    • DOI

      doi.org/10.1107/S205225251900246X

    • Peer Reviewed / Open Access

URL: 

Published: 2021-01-27  

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