2020 Fiscal Year Research-status Report
Influence of the expression of cis,cis-muconate isomerase mutant on aromatic compounds metabolism
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17K07706
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| Research Institution | Hirosaki University |
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Principal Investigator |
園木 和典 弘前大学, 農学生命科学部, 准教授 (20502264)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2022-03-31
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| Keywords | cis,cis-ムコン酸 / リグニン / Pseudomonas putida |
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| Outline of Annual Research Achievements |
安息香酸 (BA) からcis,cis-muconic acid (ccMA) を培養温度に依存して蓄積する変異株のRNA-seq解析から, その発現が顕著に上昇または減少した6遺伝子 [PP_2121(lipoprotein)、vacJ (lipoprotein VacJ)，PP_0036 (transcriptional regulator)，PP_1550 (Cro/CI family transcriptionalregulator)，PP_4349 (hypothetical protein)，PP_5701 (hypothetical protein) を絞り込んだ。それぞれの遺伝子破壊株，遺伝子発現株を作出し，BA資化性の温度感受性に対する効果を評価した。6遺伝子中4遺伝子の発現・破壊は，BAからccMAを温度依存的に蓄積する表現型に対して影響はなく，原因遺伝子である可能性が低いことが示唆された。PP_0036遺伝子，PP_4349遺伝子の発現も前記の表現型に対して影響はなかったが，破壊株が得られなかった。これら2遺伝子は生育必須遺伝子と考えられ，またccMAを温度依存的に蓄積する表現型には, これら2遺伝子の制御下にある遺伝子群の関わりも考えられた。
本研究ではccMA生産の効率化に向けて, リグニン由来芳香族化合物からのccMA生産に効果的な機能の探索も実施し，ccMAを生産するために必須の機能であるprenylated-FMNの合成に，RNA pyrophosphohydrolaseと高い相同性を示す酵素遺伝子が関わることを見出した。この遺伝子の発現強化により，ccMA合成活性向上が示唆された。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
昨年度までに得られた研究成果について論文投稿を進める計画であったが，追加の実験作業が新型感染症対策の影響で遅延したため。
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| Strategy for Future Research Activity |
追実験は終了しており, 得られた研究成果について論文を投稿する。
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| Causes of Carryover |
当初の補助事業期間中に得られた研究成果の論文投稿が終了しなかったため、次年度使用額が生じた。次年度、掲載決定後に掲載料を支出する。
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Research Products
(1 results)
