2018 Fiscal Year Research-status Report
サリドマイドとアミノ基置換体のヒト化動物とヒト胎盤細胞による体内代謝的活性化評価
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17K08425
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| Research Institution | Showa Pharmaceutical University |
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Principal Investigator |
山崎 浩史 昭和薬科大学, 薬学部, 教授 (30191274)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
村山 典惠 昭和薬科大学, 薬学部, 講師 (90219949)
清水 万紀子 昭和薬科大学, 薬学部, 准教授 (90307075)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | サリドマイド / 胎盤 / 肝 / 酵素誘導 / 代謝的活性化 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
ヒト胎盤標本およびヒト胎盤由来BeWo細胞をin vitro酵素源として、サリドマイド関連化合物群の代謝的活性化と酵素誘導を評価した。ヒト胎盤標本および胎盤BeWo細胞は、低いながらも検出可能なP450 3A4/5 ｍRNA発現および薬物酸化活性を示した。すなわち複数の個体別に得られたヒト胎盤ミクロソーム画分は、検出可能なミダゾラム1'- および4-ヒドロキシル化およびサリドマイド5-ヒドロキシル化活性を示した。推奨培地で培養したヒト胎盤BeWo細胞も、検出可能なミダゾラムの1'-および4-水酸化およびサリドマイド5-水酸化活性を示した。推奨培地に使用される内因性ホルモンによるマスキング効果を減少させるために、5％チャコール処理ウシ胎児血清を含有する改変培地と共に培養した胎盤BeWo細胞において、P450 3A4/5 ｍRNAの誘導および酸化活性が認められた。サリドマイドは、P450 3A4/3A5、2B6、およびプレグナンX受容体（PXR）mRNAレベルを2-3倍有意に誘導したが、リファンピシンは改変培地条件下でP450 3A5およびPXR mRNAのみを増強した。これらの修飾条件下では、サリドマイドはミダゾラムの1'-ヒドロキシル化およびサリドマイドの5-ヒドロキシル化活性を3倍有意に誘導したが、ブプロピオンヒドロキシル化活性は誘導しなかった。まとめると、in vitroで認められたヒト胎盤におけるP450 3A酵素の自己誘導を伴うサリドマイドの5-ヒドロキシサリドマイドへの活性化は、肝および胎盤が複雑に連携するin vivo状態でも起こりうることが推察された。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
ヒト胎盤細胞を活用した医薬品の代謝的旗活性化反応を、細胞培養条件を工夫することで自己酵素誘導作用とともに明示し、論文化できたことから、一定の成果を得たものと判断している。
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| Strategy for Future Research Activity |
最終年度に向けて、ここまでに得られた成果を統合し、フタル酸骨格を有する医薬品や一般化学物質のヒト型代謝反応とその触媒酵素の自己誘導に着目した研究をまとめていく。ヒト人工多能性幹（iPS）細胞から分化した肝細胞様細胞は、薬理学的研究における応用にとって非常に興味深い。薬物代謝試験では、ヒトiPS細胞由来の市販の肝細胞をプレートに播種してから1週間後に使用することが一般的に推奨されている。しかし、筆者らは3ー4週間培養した後、iPS由来肝細胞のP450 2C9および2C19に依存するジクロフェナク4'-水酸化およびオメプラゾール5-水酸化活性は有意に高いことを見出している。in vitro系の知見をin vivo予測につなぐための研究を、本課題の解決を通して、さらに推進していく。
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| Causes of Carryover |
極めて少額の端数が生じた。
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[Journal Article] Assessment of multiple cytochrome P450 activities in metabolically inactivated human liver microsomes and roles of P450 2C isoforms in reaction phenotyping studies2018
Author(s)
Shimura, K., Ishii, Y., Takada, M., Uno, Y., Utoh, M., Iwasaki, K., and Yamazaki, H.
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Journal Title
Biopharm. Drug Dispos.
Volume: 39
Pages: 115-121
DOI
Peer Reviewed
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