2019 Fiscal Year Annual Research Report
Elucidation of the regulatory basis for alternative splicing towards controlling HIV-1 replication
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17K08860
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| Research Institution | The University of Tokushima |
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Principal Investigator |
野間口 雅子 徳島大学, 大学院医歯薬学研究部(医学域), 教授 (80452647)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | HIV-1 / Vif / Vpr / alternative splicing |
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| Outline of Annual Research Achievements |
HIV-1の選択的スプライシングはmRNA/タンパク質産生に影響するため、効率的なウイルス複製に重要な過程である。我々は、HIV-1ゲノム上に存在するスプライシングアクセプター（SA）1とスプライシングドナー（SD）2近傍領域（SA1D2prox）が、HIV-1複製に必須のウイルスタンパク質Vifの発現量調節領域であることを報告した。本研究では、HIV-1ゲノムにおいて、ウイルスのタンパク質（特に、VifとVpr）発現量やウイルス複製能を調節する新たな領域の同定を目指した。
HIV-1はサブタイプ間でアミノ酸配列やVif活性が異なる。Vifコード領域内には、vpr mRNA産生に関わるSA2/SD3が存在する。我々は、SA1D2prox研究からVifとVprの発現量とが逆相関することも見出している。これらより、vifコード領域の塩基配列が、Vif/Vpr発現量に影響し得ると考えた。サブタイプB（NL4-3）とサブタイプC（Indie C）由来のSA1D2proxおよびvifの配列を用いて、NL4-3をバックボーンとして種々のキメラ型のプロウイルスクローンを作製した。その結果、IndieC由来のSA1D2proxやvifの配列を持つウイルスにおいて、Vif発現量の低下とVpr発現量の増加が認められた。特にvifの配列がIndie C由来になると、より顕著にVif発現量が低下した。そこで、vif配列内のキメラ型プロウイルスクローンを種々作製し、vif配列内においてどの領域がVif発現量の低下に寄与するのかを調べた。Vif発現量が低下するクローンの共通点は、SA2とSD3を含むVifのC末端側がIndieC由来となることであった。以上の結果から、SA1D2proxに加えて、SA2とSD3周辺領域の塩基配列もVif/Vpr発現量を変動させる領域であることが示唆された。
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