2018 Fiscal Year Research-status Report
NRDCによる洞房結節自動能制御機構および家族性洞不全症候群における意義の解明
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17K09575
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| Research Institution | Shiga University of Medical Science |
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Principal Investigator |
大野 美紀子 滋賀医科大学, 医学部, 准教授 (10583198)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | 洞不全症候群 / イオンチャネル / 洞房結節自動能 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
多機能タンパク質ナルディライジン(NRDC)の全身性遺伝子欠損マウスは、高度の徐脈を呈する。その原因の一つは、家族性洞不全症候群の原因遺伝子の一つであるイオンチャ
ネル(HCN4)の発現低下によるIf電流の低下であることが明らかとなった。今年度はさらに、前年度までに得られた結果をもとに仮説を立て直した。つまり「NRDCが核内において、転写因子と複合体を形成し、HCN4をはじめとする洞房結節自動能に必須のイオンチャネルの遺伝子発現を制御する」という仮説のもと、以下の検討を行った。
(１)NRDCが洞房結節自動能に関わるイオンチャネルの遺伝子発現を制御するのか：抗NRDC抗体及びマウス由来心クロマチンを用いたChIP法を行い、NRDCが実際にHCN1, HCN4, Cav3.1の転写調節領域（プロモーター及びエンハンサー領域）に結合することを見出した。
(２)心房(洞房結節)特異的NRDC欠損マウス(Sln-NRDC-CKO)の解析：心電図テレメトリーシステムを用いて解析を行った結果、同マウスが徐脈を呈することが明らかとなった。さらに心臓での遺伝子を検討したところ、全身性NRDC欠損マウスとほぼ同様のイオンチャネル群の発現低下を認めた。
(３)酵素活性欠失型 異NRDCノックインマウスの作製：NRDCによる転写制御に自身の酵素活性が必要である可能性が細胞実験系で見出された。NRDCのプロテアーゼ活性が生体 でどのような意義を持つのかを明らかにするために、酵素活性欠失型NRDCノックインマウスを作製した。現在ノックインマウスが得られる前段階まで来ており、間もなく解析が可能となる。
(４)遺伝子改変マウスや電気生理学的検討（パッチクランプ）で得られた結果をもとに、シミュレーションを行うこととした。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
前年度では（２）の心房・洞房結節特異的NRDC欠損マウスの解析結果がまとまり、全身性NRDC欠損マウスの表現型を再現するものとなったため。
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| Strategy for Future Research Activity |
今後は(３)の酵素活性欠失型NRDCノックインマウスの表現型が、全身性NRDC欠損マウスや心房・洞房結節特異的NRDC欠損マウスの表現型と同じであるのか否かを確認する。さらに、洞房結節細胞に特化した電気生理学的なシミュレーションを用いて、NRDCによって発現が制御されているイオンチャネル群の徐脈への寄与の程度について明らかにする予定である。
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| Causes of Carryover |
マウスの交配や解析にかかる費用が多額であり、次年度分と合わせて使用する必要が生じたため
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Research Products
(7 results)
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[Journal Article] Serum nardilysin, a surrogate marker for epithelial-mesenchymal transition, predicts prognosis of intrahepatic cholangiocarcinoma after surgical resection2019
Author(s)
Yoh T, Hatano E, Kasai Y, Fujii H, Nishi K, Toriguchi K, Sueoka H, Ohno M, Seo S, Iwaisako K, Taura K, Yamaguchi R, Kurokawa M, Fujimoto J, Kimura T, Uemoto S, and Nishi E.
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Journal Title
Clin Cancer Res.
Volume: 25(2)
Pages: 619-629
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Turbulence Activates Platelet Biogenesis to Enable Clinical Scale Ex Vivo Production.2018
Author(s)
Ito Y, Nakamura S, Sugimoto N, Shigemori T, Kato Y, Ohno M, Sakuma S, Ito K, Kumon H, Hirose H, Okamoto H, Nogawa M, Iwasaki M, Kihara S, Fujio K, Matsumoto T, Higashi N, Hashimoto K, Sawaguchi A, Harimoto KI, Nakagawa M, Yamamoto T, Handa M, Watanabe N, Nishi E, Arai F, Nishimura S, Eto K.
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Journal Title
Cell
Volume: 174(3)
Pages: 636-648
DOI
Peer Reviewed
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[Presentation] Nardilysin regulates cardiac dynamics and cardiac sympathetic innervation through modulating p75NTR shedding2018
Author(s)
大野美紀子, 西 清人, 平岡 義範, 新妻 晋一郎, 西城 さやか, 坂本 二郎, 陳 博俊, 森田 雄介, 松田 真太郎, 椋本 淑子, 清成 寛, 松浦 博, 北 徹, 木村 剛, 西 英一郎.
Organizer
神経科学大会
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[Presentation] Nardilysin is a Promising Biomarker for the Early Diagnosis of Acute Coronary Syndrome.2018
Author(s)
Ohno M, Chen P-M, Hiwasa T, Nishi K, Saijo S, Sakamoto J, Morita Y, Watanabe S, Kuwabara Y, Ono K, Imai M, Inoue K, Murai T, Kita T, Kimura T, and Nishi E.
Organizer
18th World Congress of Basic and Clinical Pharmacology
Int'l Joint Research
