2018 Fiscal Year Research-status Report
消化器癌腹膜播腫における腹腔内制御性B細胞の解析と化学療法の臨床応用
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17K10633
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| Research Institution | Kobe University |
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Principal Investigator |
山本 将士 神戸大学, 医学研究科, 助教 (20645212)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
山下 公大 神戸大学, 医学部附属病院, 特命准教授 (80535427)
鈴木 知志 神戸大学, 医学研究科, 特命教授 (30457080)
掛地 吉弘 神戸大学, 医学研究科, 教授 (80284488)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | 制御性B細胞 / 大腸癌腹膜播種 / 抗CD20抗体 / 分子標的薬 / 化学療法 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
大腸癌根治術後の腹膜再発例は予後不良であり、腹膜再発に対する治療はいまだ有効なものは見いだされていない。最近、大腸癌の病態に抗腫瘍免疫応答が関与することが数多く報告され、免疫応答を標的とした治療介入が予後改善に貢献する可能性が示唆される。癌と免疫の関係は、cancer immunoeditingという概念で説明され、“免疫逃避”に陥り癌の進展が促進される。そのバランスの破綻は、免疫抑制機構の増強が関与しているとされ、その中心的働きを示すのが、骨随由来免疫抑制性細胞(myeloid derived suppressor cell; MDSC)や制御性T細胞(regulatory T cell; Treg) である。すでにMDSCを抗がん剤や外科切除により減少させ、肺転移を制御できる可能性を示した。その免疫抑制機構の一端を担う機能を持つB 細胞に存在することが示され、各癌腫に対する制御性B細胞による抗腫瘍免疫応答の抑制とその抑制 機能の解除・遮断による腫瘍増殖抑制が報告されている。腹腔内にも局在するB細胞の動態や機能を解析し、腹水内細胞、リンパ節、末梢血、腫瘍浸潤リンパ球の解析を行う。特殊な免疫腫瘍微小環境と考えられる腹腔内の状況を中心に解析を進める。B10細胞は血液中のみならず腹腔内にも局在するとされ、 これを解析対象の中心としてB細胞の動態や機能を解析し、どのように免疫抑制機構として 関与しているかを検証する。また各病理学的因子や治療奏功割合、予後などの臨床情報との 関連も検証する。
腹腔内で腹膜播種と制御性B細胞を中心とした抑制性免疫細胞を評価する場合、腹腔内の細胞を正確に定量する必要がある。OSNA;(One step nucleic acid amplification)は、Reverse transcription loop-mediated amplification (RT-LAMP)を基礎原理として利用し、標的mRNAを 増幅・検出できる方法である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
現在はC57BL/6マウスを宿主としMC38大腸癌細胞株、また、BALB/cマウスを宿主と して大腸癌細胞株CT26を用いて、皮下樹立モデルと腹膜播種モデルのモデル作成は完了した。至適条件を検討し、モデル作成の解析はほぼ終了している。現在、制御性B細胞を中心とした抑制性細胞の評価として、洗浄腹水、末梢 血、所属リンパ節、腫瘍(皮下接種モデルのみ)において、各サブセット解析を行なっている。Polymononuclear- MDSC (PMN-MDSC)が経時的に上昇することが確認された。また腹腔内B細胞の亜分画が上昇することも確認できた。現在、ヒトに関しては、腹膜播種発症後の腹水貯留例のKARTに関して、解析を進めている。各分画のヒトでの同定方法は完成しており、すでに解析を進めgているが、症例集積が遅延しており、全体的に予定よりやや遅れている。
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| Strategy for Future Research Activity |
腹膜播種モデルにおける血性腹水で末梢血の混入の可能性が否定できんなかったが、好中球との識別マーカーの候補を調査中で、間も無く、検討が終わるために、これらの識別により、明確な分画解析を行う予定である。洗浄腹水、末梢血、所属リンパ節、腫瘍内(皮下接種モデルのみ)においてサブセット解析を行う。制御性B細胞、MDSC (M-MDSC; monocytic MDSC CD11b+Gr-1+Ly6C+Ly6Glo, PMN-MDSC; polymorphonuclear MDSC CD11b+Gr-1+Ly6CloLy6G+)の評価を確定が可能となると予測される。制御性B 細胞に関しては、分画の評価およびサイトカイン分泌の機能解析を行い、より同定を早める。ヒトでは、症例の集積が重要となる。国際がん医療研究センターの協力が得られれば、症例集積は加速するため、より早期に進められるものと考えられるが、他の関連施設にも協力を要請する予定である
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