尿路上皮癌増殖因子ラミニンγ2測定による腎盂尿管癌の高感度腫瘍マーカー開発と応用

2018 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 17K11144
• Research Institution: Kochi University
• Principal Investigator: 執印 太郎 高知大学, 医学部附属病院, 特任教授 (70128601)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 辛島 尚 高知大学, 教育研究部医療学系臨床医学部門, 准教授 (60304672)
• Project Period (FY): 2017-04-01 – 2020-03-31
• Keywords: 腎盂尿管癌 / ラミニン

Outline of Annual Research Achievements

【研究目的】腎盂尿管癌は症状に乏しく診断に際して疾患特異的腫瘍マーカーが無いため早期発見が困難である。我々は膀胱癌の腫瘍マーカーとしてラミニンγ2単鎖の高感度ELISA測定系を開発した。ラミニンγ2単鎖は、尿路上皮癌細胞に高発現する腫瘍増殖因子蛋白である。特に腎盂尿管癌患者の尿では異常な高値を示すことが示唆されている。本研究は、腎盂尿管癌マウスモデルを製作し、ラミニンγ2単鎖の基礎的研究を行うとともに、腎盂尿管癌患者由来の尿を用いてラミニンγ2単鎖を測定することで、腎盂尿管癌における新規診断マーカーの開発応用を行うことを目的とする。【研究実績】昨年度は、胸腺無形性ヌードマウスを用いて、経尿道的同所移植モデルの製作を行った。ヒト尿路上皮癌細胞株のなかで、ラミニンγ2単鎖を高発現しているKU-7およびKMBC-2を中心に腫瘍の生着率を検討した。KU-7は高率に腫瘍生着を認めたが、KU-7とHeLa細胞（子宮頸癌細胞）にクロスコンタミネーションが存在するとの報告があり（J Urol. 2013 Oct;190(4):1404-9.）、KU-7の使用を中止した。KMBC-2においては低率かつ不安定であったが、手技の向上により、約60%の腎盂生着率を得られるようになった。【次年度の研究計画】ヒト由来臨床検体を用いたラミニンγ2単鎖の測定において、『上部尿路上皮癌に対するラミニンγ２単鎖のバイオマーカーとしての有用性に関する臨床研究』として倫理委員会の承認を得た。また、保存や測定系も確立したため、近日中に臨床研究を開始する。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

ヒト由来臨床検体を用いたラミニンγ2単鎖の測定においては、検体保存方法における測定値の安定性に変動があり、検体保存方法と測定系の再検討を行っている。このことより、現在プロトコール製作ならびに倫理委員会申請の過程にとどまっている。

Strategy for Future Research Activity

ラミニンγ2単鎖測定における、安定した検体保存方法と測定系を再度検証する。現在、概ね保存方法と測定系の概要が固定してきたため、倫理委員会承認後に検体採取と測定を予定する。
また、基礎的研究においては、ラミニンγ2単鎖高発現株を遺伝子導入により人為的に製作し、より効率な腫瘍生着モデルを製作する予定である。