2017 Fiscal Year Research-status Report
脱分化脂肪細胞と凝固因子由来タンパク質を用いた新しいケロイド治療の開発
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17K11556
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| Research Institution | Nihon University |
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Principal Investigator |
仲沢 弘明 日本大学, 医学部, 教授 (60180270)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
副島 一孝 日本大学, 医学部, 准教授 (00246589)
樫村 勉 日本大学, 医学部, 准教授 (20570740)
松本 太郎 日本大学, 医学部, 教授 (50366580)
日だい 智明 日本大学, 医学部, 准教授 (70228732)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | ケロイド / 肥厚性瘢痕 / 被膜 / 第Ⅸ凝固因子由来上皮成長因子 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
脱分化脂肪細胞（以下、DFAT）ならびに凝固因子由来のたんぱく質である第Ⅸ凝固因子由来上皮成長因子（以下EGF-F9）によるケロイド治療に関する検討を行っている。
ケロイド患者の切除手術の際に採取したヒトケロイド組織の研究利用のため、プロトコール作成ならびに当施設での臨床研究審査委員会での審査の準備を行った。これらの準備に並行して、基礎データの蓄積のため以下の実験を行った。ケロイドや肥厚性瘢痕は、膠原線維の異常な増殖が組織学的な特徴である。異物に対する被膜も同様の組織学的特徴を有し、これらは良性線維増殖性病変として類縁疾患と考えることができる。平成29年度は、ラットを用いた動物実験で異物に対する被膜を作成し、EGF-F9による治療効果について検討を行った。ラットの背部にシリコンシートを埋入し、PBSをシリコンシートの表層の皮下組織に注入する対照群とEGF-F9を注入するEGF-F9投与群を作成した。EGF-F9により被膜拘縮を抑制し得るかを検討した。4週間のシリコンシートの埋入により、対照群で95.3±47.8μm、EGF-F9投与群で48.1±12.8μmの厚さの被膜がシリコンシートの周囲に形成された。EGF-F9投与群で一定した有意に薄い被膜が形成された。また、組織学的にはEGF-F9投与群で薄い被膜においてもMMPの発現を多く認め、ASMAの発現が少ない傾向を認めた。これらMMPやASMAなどが、EGF-F9による薄い被膜形成に関与していると考える。EGF-F9が良性線維増殖性病変に対し、一定の効果を持つことが示唆された。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
当初予定していた実験系では、ケロイド患者の切除手術の際に生じた組織検体を実験に使用する予定であった。ケロイド組織から得られた線維芽細胞とDFATならびにEGF-F9の共培養を行う予定であった。患者から得られる生体組織を使用するため、当施設の臨床研究審査委員会での審査が不可欠である。プロトコール作成ならびに臨床研究審査委員会での審査などの準備に時間を要したため、ケロイド患者の組織を利用する実験の開始には、遅れが生じている。
しかしながら、これらの準備に並行し被膜拘縮に関する実験を行った。ケロイドと類縁疾患である異物に対する被膜拘縮に関する動物実験である。ラットの背部に挿入したシリコンの周囲に形成される被膜が、EGF-F9の投与により有意に抑制されることを明らかにした。皮下に挿入したシリコンシートの周囲にEGF-9を投与することにより、対照群よりも有意に薄い被膜が形成されいた。EGFF-9が良性繊維増殖性疾患に対して一定の効果を持つことが示唆された。
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| Strategy for Future Research Activity |
ケロイド患者から得られた組織検体を実験で使用するための準備を進めて行く。当施設の臨床研究審査委員会の審査ならびに認可を受ける予定である。審査終了後に、DFATならびにEGF-F9との共培養実験やヌードマウスへの移植実験を開始する予定である。
並行して、被膜に関する実験についてEGF-F9投与に関して検討を追加していく。これまでに、シリコンシートを挿入し2週間と１カ月留置する異なる留置期間の群を作成し、それぞれ対照群とEGF-F9投与群で比較検討を行った。今後は、さらに2カ月留置する群を作成し検討を行う予定である。さらに得られた組織検体についてMatrix metalloproteinase（MMP）、Ⅰ型コラーゲン、Ⅲ型コラーゲンなどの免疫染色を追加して行い、そのメカニズムについても検討を行う予定である。
また、同様のシリコンシートの挿入モデルを用いてDFATを投与する動物実験も行い、その有用性についても検討する。
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| Causes of Carryover |
当初、ケロイド患者の切除手術の際に生じた組織検体を実験に使用する予定であったが、プロトコール作成ならびに臨床研究審査委員会での審査などの準備に時間を要しているため、予定していた実験を開始できなかった。また、これに並行し同じ良性繊維増殖性疾患である被膜拘縮に関する実験を行ったために使用額の変更を生じた。
次年度使用額では、臨床研究審査委員会での審査に必要な書類の整備や資料の購入の費用に充当する予定である。
来年度以降は、実験準備の進行に伴い予定していた研究計画を遂行することが可能と考える。
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