2020 Fiscal Year Annual Research Report
Translational study of dedifferentiated fat cells from the buccal fat pad / PRP complex in in mandibular regeneration
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17K11864
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| Research Institution | Osaka Dental University |
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Principal Investigator |
窪 寛仁 大阪歯科大学, 歯学部, 講師 (70388362)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
橋本 典也 大阪歯科大学, 歯学部, 教授 (20228430)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | 脱分化脂肪細胞 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
脱分化脂肪細胞（dedifferentiated fat cells：DFATs）は低侵襲に獲得可能な細胞集団であり，また多能性を有することから再生医療用ドナー細胞として有用である。またDFATsは非常に純度が高いことから，含まれる未分化な細胞の割合が高く，様々な組織の細胞へ分化する能力が高い可能性が示唆されている。われわれは骨髄幹細胞（BMSCs）に代わるドナー細胞として、より低侵襲で多くの多数の細胞を採取できる脂肪由来脱分化脂肪（DFAT）細胞に着目し、これまで研究を行ってきた。
今回、ゼラチンスポンジ（GS)を足場材料に用い、活性化多血小板血漿（aPRP）と組み合わせた細胞増殖率、骨芽細胞分化能、骨再生能力を評価した。F344系ラット（雄8週齢）の鼠径部から脂肪組織を採取してラットDFATs（rDFATs）を作製した。術後4週後に同ラットから心臓採血してaPRPを作製し、全血とaPRPとの血球数を測定した。
WST-8による細胞増殖率は、aPRPを添加することで大幅に増加した。Alizarin red染色は誘導開始の21日後にすべての実験群で陽性であったが、Runx2とOCNの発現レベルは対照群よりも7%aPRP添加条件が最も高かった。 4週間後のmicro-CTとラトックシステムを用いた骨体積および骨密度測定ではrDFATs+GS とrDFATs+aPRP+GSとを比較した場合、rDFATs+aPRP+GSの移植モデルは、9 mmの骨欠損はほぼ閉鎖され（BV/TV：60.6％）、骨体積密度を測定すると2群間では有意に高かった。さらにHE染色の結果から成熟した骨様組織を認めた。
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