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2008 Fiscal Year Annual Research Report

ルーメン内セルロース結合性タンパク質の網羅的解析

Research Project

Project/Area Number 18688015
Research InstitutionIbaraki University

Principal Investigator

豊田 淳  Ibaraki University, 農学部, 講師 (00292483)

Keywordsルーメン / セルロース結合性タンパク質 / モノクロナール抗体 / ゲノムライブラリー / セルラーゼ
Research Abstract

(目的)反芻動物のルーメン内セルロース分解を効率化するためには、その分子メカニズムについて詳細に理解する必要がある。本研究ではルーメン内でセルロース分解をするタンパク質およびその遺伝子を同定するため、ルーメンからセルロース結合性タンパク質CBPSを直接分離・同定した。本年度は下記の項目について実施した。
(結果)(1)CBPsモノクロナール抗体の評価
110種類のモノクロナール抗体産生ハイブリドーマを得た。ルーメン内容物を用いた免疫組織化学的手法で評価した。その結果、40%ほどの抗体が免疫組織化学的手法で利用できることがわかった。これらのモノクロナール抗体のなかには、ルーメン内飼料片付着菌を認識するものが含まれていた。またこの抗体を使ってルーメン内容物の免疫沈降をおこなったが、エンドグルカナーゼ活性のあるタンパク質は共沈降してこなかった。
(2)CBPs遺伝子のスクリーニング
(3)CBPs遺伝子のクローニングと大腸菌での発現
(4)新しいセルロース結合モジュールの同定
19年度に作製したルーメン内繊維付着菌のゲノムライブラリーを上記モノクロナール抗体でスクリーニングしているが、現在のところ陽性クローンは取得できていない。これについてはスクリーニング作業を継続していく予定である。
(5)ルーメン内セルロース付着菌のメタゲノム解析
ゲノムライブラリーの抗体でのスクリーニングが難航しているため、ルーメン内でアビセルセルロースに付着する菌から、直接ゲノムDNAを抽出し、大規模シーケンス解析を行った。

  • Research Products

    (6 results)

All 2009 2008 Other

All Journal Article (3 results) (of which Peer Reviewed: 3 results) Presentation (2 results) Remarks (1 results)

  • [Journal Article] Isolation and identification of cellulose-binding proteins from sheep rumen contents2009

    • Author(s)
      Atsushi Toyoda, Wataru Iio, Makoto Mitsumori, Hajime Minato
    • Journal Title

      Appl.Environ.Microbiol 75(6)

      Pages: 1667-73

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Effect of fermented soybean, "Natto" on the production and qualitie s of chicken meat2008

    • Author(s)
      K. Fujiwara, Y. Miyaguchi, X.H. Feng, A. Toyoda, Y. Nakamura, M. Yamazaki, K. Nakashima, H. Abe
    • Journal Title

      Asia-Aust. J. Anim. Sci. 21(12)

      Pages: 1766-1772

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Effect of fermented soybean"Natto" supplement on egg production and qualities2008

    • Author(s)
      K. Fujiwara, Y. Miyaguchi, A. Toyoda, Y. Nakamura, M. Yamazaki. K. Nakashima. and H. Abe
    • Journal Title

      Asia-Aust. J. Anim. Sci. 21(11)

      Pages: 1610-1615

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] 反芻動物のルーメン内容物に含まれるセルロース結合タンパク質に対する抗体ライブラリーの作製2009

    • Author(s)
      豊田淳、飯尾恒、湊一
    • Organizer
      第110回日本畜産学会大会
    • Place of Presentation
      日本大学生物資源学部
    • Year and Date
      2009-03-29
  • [Presentation] 反芻動物のルーメン内容物に含まれるセルロース結合タンパク質に対する抗体ライブラリーの作製2008

    • Author(s)
      豊田淳、飯尾恒、湊一
    • Organizer
      第81回日本生化学会、第31回日本分子生物学会合同大会
    • Place of Presentation
      神戸国際会議場
    • Year and Date
      2008-12-09
  • [Remarks]

    • URL

      http://info.ibaraki.ac.jp/scripts/websearch/index.htm

URL: 

Published: 2010-06-11   Modified: 2016-04-21  

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